| TaqMan-LNA探针荧光定量PCR快速检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒 |
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| 引用本文： | 韦信贤,童桂香,谢宗升,吴祥庆,黄国秋,黄玉柳,廖永志,黎小正.TaqMan-LNA探针荧光定量PCR快速检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒[J].南方农业学报,2011,42(12):1545-1549. |
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| 作者姓名： | 韦信贤 童桂香 谢宗升 吴祥庆 黄国秋 黄玉柳 廖永志 黎小正 |
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| 作者单位： | 广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心,南宁530021上海海洋大学水产与生命学院,上海201306广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心,南宁,530021 |
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| 基金项目： | 广西直属公益性科研院所基本科研业务费专项项目(2060302GXIF-2009-05) |
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| 摘 要： | 目的]建立快速、特异、灵敏检测对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的TaqMan-LNA探针荧光定量PCR方法,为IHHNV的临床诊断和疫情监测提供更简便的检测技术.方法]根据GenBank已发表的IHHNV毒株序列,在IHHNV保守区序列设计特异性引物和TaqMan-LNA探针;对荧光定量PCR反应条件进行优化以缩短检测时间,提高特异性和灵敏度;应用TaqMan-LNA探针荧光定量PCR对广西地区的300份凡纳滨对虾样品进行检测,验证方法的实用性.结果]TaqMan-LNA探针荧光定量PCR检测IHHNV的灵敏度高,约为10个病毒粒子/反应,定量范围宽,在1.6×101~1.6×108拷贝/μL的范围内具良好的线性关系;与SPF凡纳滨对虾组织、WSSV、副溶血弧菌的DNA和TSV的RNA均无反应,特异性好;组内变异系数为0.53%~1.75%,组间变异系数为0.81%~1.14%,重复性和重现性均较好,结果稳定可靠;临床应用结果表明,300份凡纳滨对虾样品检出193份阳性,阳性率为64.3%,表明广西沿海地区养殖的凡纳滨对虾IHHNV感染率较高.结论]利用TaqMan-LNA探针建立检测IHHNV的荧光定量PCR方法具有快速、特异、灵敏、重复性好、能定量等优点,可用于对虾IHHNV的检测.
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| 关 键 词： | 凡纳滨对虾 传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV) TaqMan-LNA探针 荧光定量PCR |
Rapid detection of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus in shrimps using TaqMan-LNA probe real-time PCR |
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| WEI Xin-xian,TONG Gui-xiang,XIE Zong-sheng,WU Xiang-qing,HUANG Guo-qiu,HUANG Yu-liu,LIAO Yong-zhi,LI Xiao-zheng.Rapid detection of infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus in shrimps using TaqMan-LNA probe real-time PCR[J].Journal of Southern Agriculture,2011,42(12):1545-1549. |
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| Authors: | WEI Xin-xian TONG Gui-xiang XIE Zong-sheng WU Xiang-qing HUANG Guo-qiu HUANG Yu-liu LIAO Yong-zhi LI Xiao-zheng |
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| Institution: | 1(1 Fisheries Disease Prevention Environmental Monitoring and Quality Testing Center of Guangxi,Nanning 530021,China;2 College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | |
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