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两种培养条件下重组杆状病毒表达小反刍兽疫病毒N蛋白的丰度
引用本文:师亚玲,韩佃刚,董俊,叶玲玲,李凌枫,陈朝林,信吉阁,艾军.两种培养条件下重组杆状病毒表达小反刍兽疫病毒N蛋白的丰度[J].中国动物检疫,2022,39(2):97-102.
作者姓名:师亚玲  韩佃刚  董俊  叶玲玲  李凌枫  陈朝林  信吉阁  艾军
基金项目:云南省2014年度农业科技成果转化项目;海关总署科研项目(2019HK032)
摘    要:为了在重组杆状病毒上获得高丰度表达的小反刍兽疫病毒(PPRV)N蛋白,利用细胞贴壁培养和悬浮培养法培养重组杆状病毒Vbacmin-PPRV-N 120 h,用显微镜观察不同时间点细胞形态变化,随后在培养24、48、72、96、120 h时分别收集培养液,以ELISA方法检测PPRV N蛋白表达量,并用SPSS软件对数据进行统计分析。显微镜下观察发现,在感染重组杆状病毒后,两种方式培养的细胞随着时间增加,均由形态大小均匀、圆形、透亮、折光性好,变为大小不均匀、折光性差,并且出现了很多细胞碎片。根据ELISA检测结果,摇瓶悬浮培养条件下PPRV N蛋白的表达量显著高于贴壁培养,摇瓶悬浮培养的昆虫细胞蛋白表达量在96 h达到最高峰,120 h蛋白表达量开始下降,贴壁培养的昆虫细胞蛋白表达量在120 h达到最高峰。研究表明,用昆虫杆状病毒系统大规模表达PPRV N蛋白时更适合用摇瓶悬浮培养方法。本研究为优化昆虫细胞表达PRRV N蛋白的培养条件提供了参考。

关 键 词:小反刍兽疫病毒N蛋白  Sf9昆虫细胞  贴壁培养  悬浮培养  蛋白表达

Abundance of PPRV N Protein Expressed by Recombinant Baculovirus System under Two Culture Conditions
Shi Yaling,Han Diangang,Dong Jun,Ye Lingling,Li Lingfeng,Chen Chaolin,Xin Jige,Ai Jun.Abundance of PPRV N Protein Expressed by Recombinant Baculovirus System under Two Culture Conditions[J].China Journal Of Animal Quarantine,2022,39(2):97-102.
Authors:Shi Yaling  Han Diangang  Dong Jun  Ye Lingling  Li Lingfeng  Chen Chaolin  Xin Jige  Ai Jun
Abstract:
Keywords:
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