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过氧化氢诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立
引用本文:金鹿,闫素梅,史彬林,石惠宇,郭晓宇,李俊良.过氧化氢诱导的奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤模型的建立[J].动物营养学报,2014(12):3651-3658.
作者姓名:金鹿  闫素梅  史彬林  石惠宇  郭晓宇  李俊良
作者单位:内蒙古农业大学动物科学学院,呼和浩特,010018
基金项目:国家自然科学基金资助项目,高等学校博士学科点专项科研基金
摘    要:本试验旨在利用过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)作为刺激源,以细胞存活率及抗氧化指标为判断指标,建立奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)的氧化损伤模型。试验一采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为42组,每组10个重复。细胞培养液中分别添加0、100、200、400、600、800和1 000μmol/L H2O2,使之分别作用2、4、6、8、12、24 h,测定细胞数量,计算存活率。试验二是在试验一得出的适宜H2O2作用时间(本试验的结果为6 h)的基础上,采用单因子完全随机试验设计,将第3代贴壁生长的BMEC随机分为7组,每组6个重复,BMEC中添加不同浓度的H2O2(0、100、200、400、600、800和1 000μmol/L)作用细胞6 h,收集细胞和培养液测定抗氧化指标,筛选使细胞发生氧化损伤的适宜H2O2作用浓度。试验一结果表明,600μmol/L H2O2作用细胞6 h,BMEC的存活率降低至79.79%。试验二结果表明,600~1 000μmol/L组与其他各组相比均显著降低了谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性,提高了丙二醛含量(P<0.05),但600、800和1 000μmol/L组之间差异不显著(P>0.10)。结果 提示,H2O2作用浓度为600μmol/L、作用时间为6 h,使BMEC产生了明显的氧化应激,可作为建立细胞氧化损伤模型时的适宜条件。

关 键 词:奶牛乳腺上皮细胞  过氧化氢  氧化损伤模型

Establishment of Oxidative Damage Model of Bovine Mammary Epithelial Cells Induced by Hydrogen Peroxide
JIN Lu,YAN Sumei? , SHI Binlin,SHI Huiyu,GUO Xiaoyu,LI Junliang.Establishment of Oxidative Damage Model of Bovine Mammary Epithelial Cells Induced by Hydrogen Peroxide[J].Acta Zoonutrimenta Sinica,2014(12):3651-3658.
Authors:JIN Lu  YAN Sumei?  SHI Binlin  SHI Huiyu  GUO Xiaoyu  LI Junliang
Abstract:
Keywords:bovine mammary epithelial cells  hydrogen peroxide  oxidative damage model
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