| 牛IL-18融合蛋白的原核表达及生物学活性测定 |
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| 引用本文： | 田兆菊,郑玉姝,刘翠艳,胡敬东,赵宏坤.牛IL-18融合蛋白的原核表达及生物学活性测定[J].农业生物技术学报,2007,15(4):579-583. |
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| 作者姓名： | 田兆菊 郑玉姝 刘翠艳 胡敬东 赵宏坤 |
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| 作者单位： | 1. 山东农业大学动物科技学院,泰安,271018
2. 河南科技学院动物科学学院,新乡,453003 |
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| 基金项目： | 山东省重大科技专项基金;高校科技创新工程项目 |
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| 摘 要： | 将牛白细胞介素18(bovine interleukin-18,BoIL-18)的成熟蛋白基因亚克隆到原核表达载体pGEX6p-1中,并转化至大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)获得重组菌株。该重组菌经0.3mmol/L IPTG诱导8h,SDS-PAGE电泳表明,BoIL-18融合蛋白获得了高效表达,分子量约为44kD,凝胶薄层扫描分析显示,融合蛋白占工程菌菌体总蛋白的31.8%;用亲和层析法对表达产物进行纯化,检测纯化产物的生物学活性。对外周血单核细胞(PBMC)的增殖实验证明,BoIL-18融合蛋白浓度大于0.10mg/L时,对PBMC有明显的增殖作用;对IFN-γ的诱生实验显示,BoIL-18融合蛋白浓度大于0.20mg/L时,能促进IFN-γ的产生,且随着BoIL-18浓度的增加,对IFN-γ的诱生作用增强。
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| 关 键 词： | 牛白细胞介素-18 原核表达 纯化 生物学活性测定 |
| 文章编号： | 1006-1304（2007）04-0579-05 |
| 收稿时间： | 2006-10-24 |
| 修稿时间： | 2006-12-28 |
Expression and Biological Activity Assay of Bovine Interleukin-18 Fusion Protein |
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| TIAN Zhao-ju,ZHENG Yu-shu,LIU Cui-yan,HU Jing-dong,ZHAO Hong-kun.Expression and Biological Activity Assay of Bovine Interleukin-18 Fusion Protein[J].Journal of Agricultural Biotechnology,2007,15(4):579-583. |
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| Authors: | TIAN Zhao-ju ZHENG Yu-shu LIU Cui-yan HU Jing-dong ZHAO Hong-kun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | bovine interleukin-18 prokaryotic expression purification biological activity assay |
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