兔瘟病毒VP60蛋白原核表达及其应用 |
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引用本文: | 马力,杨丽梅,王艳,郭时金,沈志强,张颖.兔瘟病毒VP60蛋白原核表达及其应用[J].家畜生态学报,2013,34(5):67-70. |
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作者姓名: | 马力 杨丽梅 王艳 郭时金 沈志强 张颖 |
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作者单位: | 1. 山东省滨州畜牧兽医研究院,山东 滨州256600;2. 山东绿都安特动物药业有限公司,山东,滨州256600 |
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摘 要: | 为获得活性良好的兔出血症病毒基因工程抗原,本研究对兔出血症病毒ZB分离株的VP60基因进行了原核表达与初步应用。参照ZB株分离病毒VP60基因序列,设计合成一对特异性引物,PCR扩增长876bp的VP60基因片段。将目的片段定向克隆至pET30a表达载体中,经鉴定正确后,重组质粒转化BL21表达菌,经IPTG诱导后获得了以包涵体形式表达的重组蛋白,重组蛋白纯化后,Western blot检测表明具有良好的抗原性与特异性,以该蛋白作为诊断抗原,初步建立了检测兔瘟病毒抗体的间接ELISA诊断方法。本研究为RHDV分子流行病学调查提供了参考,为VP60蛋白结构与功能研究、RHDV抗体检测试剂盒及新型疫苗的研制奠定基础。
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关 键 词: | 兔出血症病毒 VP60蛋白 原核表达 应用 |
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