| 南方根结线虫MiPDCD6基因多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 陈晨,高永峰,王新荣,袁永强,蔡书静,刘松松,叶雯华,王燕.南方根结线虫MiPDCD6基因多克隆抗体的制备[J].福建农业学报,2023(3):322-328. |
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| 作者姓名： | 陈晨 高永峰 王新荣 袁永强 蔡书静 刘松松 叶雯华 王燕 |
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| 作者单位： | 华南农业大学植物保护学院/广东省微生物信号与作物病害防控重点实验室 |
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| 基金项目： | 广东省基础与应用基础研究基金（2019A1515012080）；;国家自然科学基金项目（31171825、30771409）； |
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| 摘 要： | 【目的】制备针对南方根结线虫食道腺蛋白MiPDCD6多克隆抗体，为进一步研究南方根结线虫MiPDCD6蛋白的致病机制提供技术支持和材料准备。【方法】将扩增MiPDCD6基因的功能片段，与原核表达质粒pET-32a(+)构建重组质粒pET-32a-MiPDCD6，然后将重组质粒转化大肠杆菌BL21细胞进行诱导表达；将纯化的根结线虫Mi PDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔，获得高效价高纯度的多克隆抗体。【结果】构建的重组质粒pET-32a-MiPDCD6转化大肠杆菌BL21细胞后，在诱导剂IPTG浓度1.0 mmol·L-1、摇床温度37℃、转速150r·min-1和振荡培养5 h条件下，成功表达MiPDCD6融合蛋白。ELISA和SDS-PAGE检测表明：将纯化的根结线虫Mi PDCD6融合蛋白免疫雄性新西兰大白兔，获得高效价高纯度的多克隆抗体，效价约为1∶50 000。【结论】明确了MiPDCD6基因原核表达条件；制备获得的根结线虫MiPDCD6蛋白的多克隆抗体效价和纯度较高，可用于后续研究MiPDCD6蛋白在南方根结线虫致病机理中发挥的...
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| 关 键 词： | MiPDCD6 多克隆抗体 南方根结线虫 效价 |
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