| 马链球菌马亚种8组分融合蛋白的表达及小鼠免疫效果的评价 |
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| 引用本文： | 何聆瑜,祖浩宇,王宁,杨光璞,杜承,王晓钧,郭巍.马链球菌马亚种8组分融合蛋白的表达及小鼠免疫效果的评价[J].中国预防兽医学报,2023(2):191-200. |
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| 作者姓名： | 何聆瑜 祖浩宇 王宁 杨光璞 杜承 王晓钧 郭巍 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家重点研发计划项目：中国-哈萨克斯坦跨境动物疫病防控联合研究及“一带一路”科技合作平台建设(2020YFE0203400)； |
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| 摘 要： | 马腺疫是由马链球菌马亚种(S. equi)引起的急性接触性马属动物传染病，严重影响幼驹的生长发育。我国尚无预防该病的有效疫苗，也缺乏S. equi动物感染和免疫保护模型。为在原核系统中表达马链球菌马亚种(S. equi)的多组分融合蛋白，并评价其对小鼠的免疫保护效果，本研究以S. equi HLJ2018株DNA为模板，分别经PCR扩增其cne、eag、SclC、SclI、SclF、eq5、eq8和ideE基因，并分别克隆至pGEX-6p-1载体中，构建表达这8个蛋白的重组质粒并分别经PCR和测序鉴定。通过在各基因之间引入蛋白接头Gly-Gly-Gly编码基因序列并利用同源重组技术依次串联该8个基因，得到融合基因se8，利用其构建重组质粒pET-28a-SE8 (His标签)及pGEX-6p-1-SE8(GST标签)，均经PCR和测序鉴定后，将这两个表达SE8及分别表达该8个蛋白的重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3)，经IPTG诱导表达后采用亲和柱层析法纯化，采用SDS-PAGE检测各蛋白的表达及纯化效果；采用western blot检测各蛋白的反应原性。SDS-PAGE结果显示...
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| 关 键 词： | 马链球菌马亚种 多组分融合蛋白 亚单位疫苗 |
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