单增李斯特菌感染并调控宿主丙酰辅酶A羧化酶α(PCCA)的研究 |
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引用本文: | 魏思雨,陈绵绵,刘郁匆,章先,江玲丽,孙静,宋厚辉,程昌勇.单增李斯特菌感染并调控宿主丙酰辅酶A羧化酶α(PCCA)的研究[J].中国预防兽医学报,2023(8):787-793. |
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作者姓名: | 魏思雨 陈绵绵 刘郁匆 章先 江玲丽 孙静 宋厚辉 程昌勇 |
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作者单位: | 1. 浙江农林大学动物科技学院/动物医学院/浙江省畜禽绿色生态健康养殖应用技术研究重点实验室/动物健康互联网检测技术浙江省工程研究中心/浙江省动物医学与健康管理国际科技合作基地/中澳动物健康大数据分析联合实验室;2. 宁波卫生职业技术学院 |
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基金项目: | 浙江省自然科学基金(LZ19C180001、LY19C180001);;国家自然科学基金(31872620、32172849、32002358、31972648); |
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摘 要: | 为探究单增李斯特菌感染与宿主丙酰辅酶A羧化酶α (PCCA)表达的相互影响机制,本研究将单增李斯特菌野生株(LM-EGD-e)以MOI 200感染He La细胞5 h后,利用q RT-PCR检测感染LM-EGD-e后HeLa细胞中Pcca基因的转录水平变化,结果显示LM-EGD-e感染HeLa细胞中Pcca基因的转录水平无明显变化(log2FC=-0.305);采用相应试剂盒分别提取感染后的He La细胞蛋白和线粒体蛋白,采用western blot检测PCCA蛋白表达变化,结果显示,LM-EGD-e感染后的HeLa细胞中,以及线粒体中PCCA蛋白表达水平均无显著变化(P>0.05)。PCR扩增Pcca基因后构建p CMV-N-HA-PCCA重组质粒,并经PCR和测序鉴定正确后转染HeLa细胞中过表达PCCA蛋白后,利用q RT-PCR检测HeLa细胞中Pcca基因的转录水平,收集细胞总蛋白采用western blot检测PCCA蛋白表达水平,结果显示,与转染空载体的细胞相比,转染重组质粒的HeLa细胞中Pcca基因的转录水平上调(log2FC=8.454),且细胞内PCCA蛋白...
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关 键 词: | 单增李斯特菌 丙酰辅酶A羧化酶α (PCCA) 病原宿主调控关系 |
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