| 兔源F型多杀性巴氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 王锦祥,林松华,陈冬金,孙世坤,陈岩锋,高承芳,桑雷,谢喜平.兔源F型多杀性巴氏杆菌荧光定量PCR检测方法的建立[J].中国预防兽医学报,2023(2):156-160. |
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| 作者姓名： | 王锦祥 林松华 陈冬金 孙世坤 陈岩锋 高承芳 桑雷 谢喜平 |
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| 作者单位： | 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 |
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| 基金项目： | 福建省科技计划公益类专项(2020R10260015、2022R10260012)；;福建省农业科学院科技创新团队建设(CXTD2021007-2)； |
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| 摘 要： | 为建立特异性强且敏感性高的兔源F型多杀性巴氏杆菌(Pm)快速检测方法，本实验根据F型Pm fcbD基因的保守序列设计特异性引物和探针，经反应条件优化，建立了检测兔源F型Pm的荧光定量PCR方法。利用该方法检测兔源F型Pm、兔源A和D型Pm、支气管败血波氏杆菌、肺炎克雷伯菌、大肠杆菌、魏氏梭菌和金黄色葡萄球菌等临床常见兔源病原菌，结果显示，该方法仅对兔源F型Pm检测为阳性，其余病原菌均为阴性，特异性强。利用该方法分别检测10倍倍比稀释(1×108拷贝/μL～1×100拷贝/μL)的兔源F型Pm基因组DNA，进行敏感性试验，结果显示该方法的检测限为10拷贝/μL，敏感性分别是已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法的100倍和10倍，敏感性高。利用该方法对不同稀释度的质粒标准品进行批内和批间重复性试验，结果显示，批内和批间变异系数均小于3%，重复性好。利用该方法检测64份已知结果的临床样品，结果显示该方法的检测结果与已报导的双重PCR方法和环介导等温扩增方法检测结果的符合率均为100%，准确性高。本研究首次以fcbD为靶基因建立兔源F型Pm的荧...
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| 关 键 词： | 兔 F型多杀性巴氏杆菌 fcbD基因 荧光定量PCR方法 |
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