| 轮状病毒VP4基因和VP7基因原核表达载体的构建及表达 |
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| 引用本文： | 王鹏雁,余兴龙,等.轮状病毒VP4基因和VP7基因原核表达载体的构建及表达[J].中国兽医科技,2003,33(1):5-10. |
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| 作者姓名： | 王鹏雁 余兴龙 |
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| 作者单位： | [1]石河子大学动物科技学院，新疆石河子832003 [2]解放军军需大学军事兽医研究所，吉林长春130062 |
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| 摘 要： | 经PCR从含有VP4基因、VP7基因片段的重组质粒pT-VP4和pT-VP7中护增VP4、VP7基因，连接至pGEM-5zf( )。经筛选和鉴定正确后同时酶切目的基因和表达质粒pET-28a( )，连接、转化受体菌，经PCR、酶切和序列分析证明，连接向位和阅读框架是正确的，从而构建了轮状病毒保护性抗原VP4基因、VP7基因片段的原核表达载体pET28a-VP4、pET28a-VP7。重组质粒转化表达菌在IPTG诱导下，用SDS-PAGE、薄层凝胶扫描分析表达的蛋白。结果表明，表达的目的蛋白以包涵体的形式存在，蛋白的分子量分别为37.69和36.20ku，表达量占菌体总蛋白的比例分别为17.1%和14.4%。
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| 关 键 词： | 轮状病毒 VP4基因 VP7基因 原核表达载体 载体构建 |
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