| 广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 苏琦,汤亚飞,佘小漫,蓝国兵,于琳,吴正伟,李正刚,何自福.广东省蒲瓜病毒种类鉴定及多重RT-PCR检测方法的建立[J].中国农业科学,2023(23):4684-4695. |
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| 作者姓名： | 苏琦 汤亚飞 佘小漫 蓝国兵 于琳 吴正伟 李正刚 何自福 |
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| 作者单位： | 1. 广东海洋大学滨海农业学院;2. 广东省农业科学院植物保护研究所/广东省植物保护新技术重点实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（32272509）；;广州市科技计划（202102020504）； |
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| 摘 要： | 【目的】探明侵染广东省蒲瓜的病毒种类，建立一种可以同时检测多种蒲瓜病毒的RT-PCR检测方法，提高蒲瓜病毒种类鉴定效率，为蒲瓜病毒病的精准监测与防控提供依据。【方法】2018—2022年间，从广东省广州市、惠州市、清远市、汕头市和湛江市的蒲瓜主要种植区采集蒲瓜病毒病疑似样品78份，对采集的样品按照地区和症状进行分类，提取每份样品的总RNA，将一个地区具有相同症状样品的RNA等量混合后进行小RNA深度测序分析。根据小RNA深度测序分析结果，设计特异引物进行RT-PCR验证，从而明确侵染广东省蒲瓜的病毒种类。挑选6种检出率高、危害严重的蒲瓜病毒，根据GenBank数据库设计多重PCR检测引物，通过优化反应体系和反应条件，建立同时检测6种蒲瓜病毒的多重RT-PCR方法。【结果】从采集的78份蒲瓜疑似病毒病样品中，共检测到12种病毒，按照检出率从高到低分别为葫芦内源RNA病毒（Lagenaria siceraria alphaendornavirus,LSEV）(64.1%)、黄瓜绿斑驳花叶病毒（cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV）(62.8%)、...
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| 关 键 词： | 蒲瓜 病毒病 小RNA深度测序 RT-PCR检测 多重PCR方法 |
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