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利用酵母双杂交系统筛选金针菇DASH型隐花色素互作蛋白
引用本文:李婧霆,陆欢,李巧珍,徐珍,宋春艳,尚晓冬,王瑞娟,刘建雨.利用酵母双杂交系统筛选金针菇DASH型隐花色素互作蛋白[J].食用菌学报,2023(1):27-35.
作者姓名:李婧霆  陆欢  李巧珍  徐珍  宋春艳  尚晓冬  王瑞娟  刘建雨
作者单位:1. 上海海洋大学食品学院;2. 上海市农业科学院食用菌研究所农业农村部南方食用菌资源利用重点实验室国家食用菌工程技术研究中心国家食用菌加工技术研发中心
摘    要:提取金针菇(Flammulina filiformis)单核体菌株Dan 3菌丝的总RNA,分离纯化mRNA,合成双链cDNA,依次构建酵母双杂交初级和次级cDNA文库。通过酶切连接法构建诱饵载体pGBKT 7-CRY,其无自激活活性和毒性,与构建的次级cDNA文库共转化酵母感受态细胞,筛选与金针菇DASH型隐花色素(FfCRY-DASH)互作的蛋白,对筛选到的6个蛋白进行回补验证,最终发现一个与金针菇DASH型隐花色素互作的蛋白。

关 键 词:金针菇  FfCRY-DASH  酵母双杂交  互作蛋白
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