| 兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备 |
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| 引用本文： | 王玢瑸,哲名家,刘光清.兔出血症病毒VPg蛋白的原核表达及抗体制备[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2013,41(3):45-49. |
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| 作者姓名： | 王玢瑸 哲名家 刘光清 |
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| 作者单位： | 西北农林科技大学 动物医学院；中国农业科学院 上海兽医研究所;西北农林科技大学 动物医学院；中国农业科学院 上海兽医研究所;中国农业科学院 上海兽医研究所 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31101848,31270194) |
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| 摘 要： | 【目的】构建重组兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)VPg(Viral Protein Ge-nome-Linked,VPg)蛋白基因的原核表达质粒,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达和纯化VPg蛋白,制备多克隆抗体,并检测抗体的基本特性。【方法】用PCR方法扩增RHDVVPg基因,将其克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导,使之重组表达VPg蛋白,并用镍柱亲和层析法纯化重组蛋白。PCR扩增获得了345bp的VPg基因,用纯化的重组VPg蛋白免疫试验兔,制备抗VPg的多克隆抗体,用Western blot检测其特异性。【结果】构建了pET-30a/VPg原核表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株后,成功表达了VPg蛋白。用该蛋白免疫试验兔后,制备的多克隆抗体能与VPg蛋白特异性反应。【结论】成功表达了RHDV VPg蛋白,并制备了特异性良好的多克隆抗体。
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| 关 键 词： | VPg 原核表达 多克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2012/6/18 0:00:00 |
Prokaryotes expression and antibody preparation of viral genome-linked protein VPg for rabbit hemorrhagic disease virus |
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| WANG Bin-bin,ZHE Ming-jia,LIU Guang-qing,ZHANG Miao-tao.Prokaryotes expression and antibody preparation of viral genome-linked protein VPg for rabbit hemorrhagic disease virus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2013,41(3):45-49. |
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| Authors: | WANG Bin-bin ZHE Ming-jia LIU Guang-qing ZHANG Miao-tao |
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| Institution: | 1(1 College of Veterinary Medicine,Northwest A&F University,Yangling,Shaanxi 712100,China; 2 Shanghai Veterinary Research Institute,Chinese Academy of Agricultural Sciences,Shanghai 200241,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | VPg prokaryotes expression polyclonal antibody |
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