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2,2'-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐诱导的氧化应激对猪肠上皮细胞活力及线粒体功能的影响
作者单位:广东省农业科学院动物科学研究所,畜禽育种国家重点实验室,农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广东畜禽肉品质量安全控制与评定工程技术研究中心,广州510640;广东省农业科学院动物科学研究所,畜禽育种国家重点实验室,农业农村部华南动物营养与饲料重点实验室,广东省畜禽育种与营养研究重点实验室,广东畜禽肉品质量安全控制与评定工程技术研究中心,广州510640;岭南现代农业科学与技术广东省实验室茂名分中心,茂名525000
基金项目:应用基础研究项目;广州市科技计划;广东省农业科学院人才培养计划;广东省农业科学院人才培养计划;广东省农业科学院人才培养计划;广东省现代农业产业技术体系饲料产业创新团队
摘    要:本试验旨在评估2,2’-偶氮二(2-脒基丙烷)二盐酸盐(AAPH)诱导的氧化应激对猪肠上皮细胞(IPEC-J2细胞)活力及线粒体功能的影响,以期建立一种稳定的体外研究肠道氧化应激的模型。以不同浓度(0、30、32、34 mmol/L) AAPH处理IPEC-J2细胞24 h后,检测细胞活力、细胞增殖、细胞内总活性氧(ROS)含量、线粒体膜电位、线粒体DNA(mtDNA)拷贝数以及线粒体功能相关基因线粒体转录因子A(TFAM)、线粒体转录因子B1(TFB1M)、线粒体转录因子B2(TFB2M)、解耦连蛋白1(UCP1)、解耦连蛋白2(UCP2)、解耦连蛋白3(UCP3)]表达的变化。结果表明:AAPH对IPEC-J2细胞活力的影响呈剂量及作用时间依赖关系。与0 mmol/L AAPH处理相比,不同浓度(30、32、34 mmol/L) AAPH处理均显著抑制了IPEC-J2细胞增殖(P0.05),细胞活力显著下降(P0.05),细胞内总ROS含量显著升高(P0.05),细胞线粒体功能相关基因(TFAM、TFB1M、TFB2M、UCP1、UCP3)表达显著下调(P0.05),mtDNA拷贝数显著降低(P0.05)。综上所述,AAPH诱导的氧化应激通过增加IPEC-J2细胞内总ROS含量引起细胞线粒体功能损伤,进而导致细胞活力下降,抑制细胞增殖。

关 键 词:AAPH  氧化应激  肠上皮细胞  线粒体
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