| 鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建 |
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| 引用本文： | 周生,戴亚斌,唐梦君,刘梅,程旭,吕晓娟.鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建[J].中国家禽,2010,32(23). |
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| 作者姓名： | 周生 戴亚斌 唐梦君 刘梅 程旭 吕晓娟 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金，江苏省家禽科学研究所科研基金 |
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| 摘 要： | 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。
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| 关 键 词： | 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 感染性克隆 病毒拯救 |
Construction of An Infectious Full-length cDNA Clone of Infectious Bronchitis Virus H120 Vaccine Strain |
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| ZHOU Sheng,DAI Yabin,TANG Mengjun,LIU Mei,CHENG Xu,L Xiaojuan.Construction of An Infectious Full-length cDNA Clone of Infectious Bronchitis Virus H120 Vaccine Strain[J].China Poultry,2010,32(23). |
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| Authors: | ZHOU Sheng DAI Yabin TANG Mengjun LIU Mei CHENG Xu L Xiaojuan |
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| Institution: | ZHOU Sheng,DAI Yabin,TANG Mengjun,LIU Mei,CHENG Xu,L(U) Xiaojuan |
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