| Wip1过表达转基因小鼠模型的制备与鉴定 |
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| 引用本文： | 高倩,胡言青,唐懿挺,牟玉莲.Wip1过表达转基因小鼠模型的制备与鉴定[J].中国畜牧兽医,2016,43(12):3094-3100. |
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| 作者姓名： | 高倩 胡言青 唐懿挺 牟玉莲 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所, 北京 100193 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（31572378） |
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| 摘 要： | 本研究旨在构建Wip1过表达转基因小鼠，并对Wip1过表达转基因小鼠进行RNA水平上的筛选，为研究动脉粥样硬化的发生机制提供一种动物模型。通过逆转录聚合酶链式反应（RT-PCR）获得小鼠组织的cDNA，并以其为模板进行PCR扩增，对扩增片段进行胶回收，然后进行扩增片段和空载体的双酶切，将酶切后胶回收得到的Wip1基因全长与载体pcDNA3.1（+）进行连接，获得Wip1-pcDNA3.1（+）过表达载体，最终得到Wip1过表达转基因原代小鼠，并利用Southern blotting方法和实时荧光定量PCR方法对小鼠进行鉴定筛选。试验获得Wip1过表达转基因原代小鼠30只，利用Southern blotting方法鉴定出阳性小鼠11只，阳性率为36.67%，实时荧光定量PCR筛选Wip1过表达转基因小鼠阳性率为32.84%。以上结果表明，试验成功构建了Wip1-pcDNA3.1（+）过表达载体，并且经过Wip1基因在小鼠组织DNA和RNA水平上的鉴定筛选，成功获得了Wip1过表达转基因小鼠。
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| 关 键 词： | Wip1 过表达 小鼠模型 |
| 收稿时间： | 2016-06-03 |
Establishment and Identification of Wip1 Over-expressed Transgene Mice Model |
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| GAO Qian,HU Yan-qing,TANG Yi-ting,MU Yu-lian.Establishment and Identification of Wip1 Over-expressed Transgene Mice Model[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2016,43(12):3094-3100. |
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| Authors: | GAO Qian HU Yan-qing TANG Yi-ting MU Yu-lian |
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| Institution: | Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Wip1 over-expression mouse model |
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