| 猪乙型脑炎病毒E蛋白结构域Ⅲ原核表达和抗原性分析 |
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| 引用本文： | 厚华艳,丁玲玲,吕茂杰,杨保收.猪乙型脑炎病毒E蛋白结构域Ⅲ原核表达和抗原性分析[J].中国畜牧兽医,2016,43(4):934-939. |
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| 作者姓名： | 厚华艳 丁玲玲 吕茂杰 杨保收 |
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| 作者单位： | 1. 天津瑞普生物技术股份有限公司瑞普生物研究院, 天津 300308;2. 农业部生物兽药创制重点实验室, 天津 300308 |
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| 基金项目： | 瑞普生物研究院猪乙型脑炎耐热保护剂活疫苗专项基金项目(RPBVI20130008) |
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| 摘 要： | 为分析猪乙型脑炎病毒(JEV)E蛋白Ⅲ结构域的抗原性,本研究克隆了JEV疫苗株SA14-14-2的E蛋白结构域Ⅲ,并通过pET-28a载体进行融合表达和纯化。用纯化后蛋白作为免疫原,免疫8周龄BALB/c小鼠,通过SDS-PAGE、Western blotting、间接ELISA及间接免疫荧光方法(IFA)检测小鼠及猪抗体滴度,验证E蛋白结构域Ⅲ的抗原性。SDS-PAGE结果表明融合蛋白以包涵体形式表达;Western blotting、间接ELISA检测结果表明表达产物具有良好的抗原性;纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠ELISA方法检测特异性抗体滴度可达1×105;猪JEV阳性血清ELISA抗体滴度可达5.1×104;IFA结果表明JEV E Ⅲ蛋白产生的抗血清能很好的识别乙型脑炎病毒抗原。以上结果表明,表达、纯化的重组JEV E Ⅲ蛋白具有良好的抗原性。本试验结果为建立以E蛋白结构域为抗原的诊断方法提供了重要依据。
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| 关 键 词： | 猪乙型脑炎病毒 E蛋白 结构域Ⅲ 诊断抗原 |
| 收稿时间： | 2015-09-21 |
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