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萝卜MSAP体系优化与抽薹过程中MSAP分析
引用本文:柳李旺,宋贤勇,龚义勤,杨金兰,汪隆植.萝卜MSAP体系优化与抽薹过程中MSAP分析[J].江苏农业科学,2006(6):203-206.
作者姓名:柳李旺  宋贤勇  龚义勤  杨金兰  汪隆植
作者单位:南京农业大学园艺学院,作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏,南京,210095
基金项目:国家自然科学基金项目(编号:30300238,30571193),江苏省自然科学基金项目(编号:KB2004418),江苏省高技术研究计划项目(编号:BG2005314)
摘    要:对萝卜基因组DNA的MSAP关键步骤进行了优化并应用于抽薹过程中甲基化样式分析。研究表明,MSAP分析需要较高纯度的模板DNA,HpaⅡ/M spⅠ-EcoRⅠ酶切连接体系中可选用10×T 0.1%BSA Buffer作为通用缓冲液,适宜的酶切连接条件为37℃,4 h;预扩增产物稀释50倍作为选择性扩增体系反应模板,用优化的体系可获得稳定的MSAP银染指纹图谱;在优化体系的基础上,使用18对引物分析了萝卜抽薹过程中DNA甲基化水平的变化情况,结果表明在未现蕾—现蕾—抽薹过程中基因组DNA甲基化水平先降低,随着花茎的伸长DNA甲基化水平又逐渐上升,各个时期,CCGG内侧胞嘧啶完全甲基化程度均高于半甲基化的程度。

关 键 词:萝卜  抽薹  MSAP  DNA甲基化  体系优化
文章编号:1002-1302(2006)06-0203-04
收稿时间:2006-06-07
修稿时间:2006年6月7日

Optimization for MSAP system of genomic DNA and MSAP analysis in the bolt process of radish
Liu Liwang.Optimization for MSAP system of genomic DNA and MSAP analysis in the bolt process of radish[J].Jiangsu Agricultural Sciences,2006(6):203-206.
Authors:Liu Liwang
Abstract:
Keywords:MSAP
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