| 应用重组杆状病毒表达猪瘟病毒糖基化EO(Erns)蛋白 |
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| 引用本文： | 李文良,毛立,张纹纹,江杰元.应用重组杆状病毒表达猪瘟病毒糖基化EO(Erns)蛋白[J].畜牧与兽医,2013,45(3). |
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| 作者姓名： | 李文良 毛立 张纹纹 江杰元 |
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| 作者单位： | 江苏省农业科学院兽医研究所/农业部兽用生物制品工程技术重点实验室/国家兽用生物制品工程技术研究中心,江苏南京,210014 |
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| 基金项目： | 江苏省农业科技自主创新资金项目(SCX |
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| 摘 要： | 通过PCR方法扩增出包含糖基化信号肽的猪瘟兔化弱毒疫苗株E0 (Ems)蛋白基因,末端引入6×His标签序列,将其克隆到Bac-to-Bac杆状病毒表达系统pFastBacTM HT B载体中,将阳性重组质粒pF-E0转化DH10Bac感受态大肠杆菌,经蓝白斑筛选和PCR鉴定,获得重组Bacmid质粒(rBac-E0).转染对数生长期的Sf9昆虫细胞获得重组杆状病毒rAc-E0.经Western blot鉴定重组蛋白正确表达,且具有良好的抗原性；用糖苷酶PNGase F处理后重组蛋白分子量减小为32 ku,表明重组蛋白为糖基化蛋白.这为进一步研究E0蛋白的功能、亚单位疫苗和诊断试剂的开发奠定了基础.
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| 关 键 词： | 猪瘟病毒 E0 重组杆状病毒 糖基化 |
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