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草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析
引用本文:王杭军,叶星,田园园,张莉莉,邓国成.草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株VP5蛋白功能及免疫原性分析[J].水产学报,2013,37(1):109-116.
作者姓名:王杭军  叶星  田园园  张莉莉  邓国成
作者单位:1. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广东广州510380;上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
2. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,农业部热带亚热带水产资源利用与养殖重点实验室,广东广州510380
基金项目:广东省重点科技项目(2008A020100016);广东省海洋渔业科技项目(A200899F01,A201101G01)
摘    要:在前期研究中分离到一株草鱼呼肠孤病毒,GCRV-GD108,并获得其全基因组序列.该病毒株的M5基因编码VP5蛋白,该蛋白与哺乳动物正呼肠孤病毒μ2蛋白具有较高的同源性及相似的NTPase结合保守区域,推测VP5蛋白也同样具有NTPase活性.为检测VP5蛋白是否具有NTPase活性及其是否具有免疫保护作用,采用已构建的原核表达载体表达VP5重组蛋白,通过孔雀绿钼酸铵法检测纯化后的重组蛋白的NTPase活性.采用DNAstar软件预测M5基因编码蛋白的抗原性,综合蛋白亲水性、表面可及性与表面抗原性三项指标,预测编码蛋白可形成抗原表位的氨基酸区域数多达86个,提示VP5蛋白具有较强的免疫原性.用重组蛋白VP5免疫健康草鱼,通过人工攻毒实验检测VP5蛋白的免疫保护作用.结果显示,VP5重组蛋白具有NTPase活性,且其NTPase活性依赖于Mg2+或Na+/K+,而Ca2+的存在可能抑制其活性;VP5蛋白可诱导草鱼产生高水平的抗体滴度,并显著提高IgM mRNA的表达水平,但未能为草鱼提供抗GCRV感染的保护.研究首次证实GCRV-GD108株VP5蛋白具有NTPase活性,但不能为草鱼提供免疫保护作用.

关 键 词:草鱼呼肠孤病毒GCRV-GD108株  重组VP5蛋白  核苷三磷酸酶  活性  免疫原性
收稿时间:2012/5/23 0:00:00
修稿时间:2012/10/5 0:00:00

Analysis of function and immunogenicity of GCRV-GD108 VP5
WANG Hangjun,YE Xing,TIAN Yuanyuan,ZHANG Lili and DENG Guocheng.Analysis of function and immunogenicity of GCRV-GD108 VP5[J].Journal of Fisheries of China,2013,37(1):109-116.
Authors:WANG Hangjun  YE Xing  TIAN Yuanyuan  ZHANG Lili and DENG Guocheng
Institution:1(1.Pearl River Fishery Research Institute,CAFS;Key Lab of Tropic & Subtropic Fisheries Resource Utilization and Aquaculture, Ministry of Agriculture,Guangzhou 510380,China; 2.College of Fisheries and Life Science,Shanghai Ocean University,Shanghai 201306,China)
Abstract:
Keywords:grass carp reovirus GD108(GCRV-GD108)  recombinant VP5 protein  nucleoside triphosphatase(NTPase)  enzymatic activity  immunogenicity
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