| 杆菌介导灰葡萄孢菌株RoseBc-3的遗传转化 |
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| 引用本文： | 范雷,张静,杨龙,李国庆.杆菌介导灰葡萄孢菌株RoseBc-3的遗传转化[J].华中农业大学学报,2013,32(2):30-35. |
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| 作者姓名： | 范雷 张静 杨龙 李国庆 |
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| 作者单位： | 华中农业大学植物科学技术学院,武汉,430070 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（30971953，31000877）和国家公益性行业（农业）科研专项（201303025） |
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| 摘 要： | 观察了农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导转化灰葡萄孢(Botrytis cinerea)菌株RoseBc-3的影响因素,并对遗传转化的有效性进行评估.结果表明:农杆菌与灰葡萄孢共培养的温度和灰葡萄孢分生孢子浓度均能影响转化效率,当共培养温度为22℃、灰葡萄孢分生孢子浓度为1×105个/mL时,转化效率最高,平均每平皿(直径9 cm)转化子数量超过100个；通过特异性引物介导的PCR和特异性探针杂交方法,证明所获得的转化子是农杆菌中T-DNA插入造成的,且大多数(87.5％)T-DNA插入为单拷贝插入；从灰葡萄孢T-DNA插入体库筛选获得了6类突变体,即产孢显著减少或不产孢突变体(占3.8％)、菌丝生长速率减慢突变体(占3.5％)、菌丝稀疏突变体(占1.6％)、菌落颜色异常突变体(占5.7％)、致病力丧失突变体(占3.3％)和致病力增强突变体(占3.0％).采用反向PCR技术和hi-TAIL PCR技术从14个灰葡萄孢突变体菌株中获得了T-DNA侧翼序列,且发现T-DNA在基因编码区和非编码区插入的频率是相同的.
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| 关 键 词： | 灰葡萄孢 农杆菌 T-DNA 遗传转化 突变体 |
| 收稿时间： | 9/8/2012 12:00:00 AM |
Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of Botrytis cinerea strain RoseBc-3 |
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| FAN Lei
,
ZHANG Jing
,
YANG Long
,
LI Guo-qing.Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of Botrytis cinerea strain RoseBc-3[J].Journal of Huazhong Agricultural University,2013,32(2):30-35. |
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| Authors: | FAN Lei ZHANG Jing YANG Long LI Guo-qing |
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| Institution: | College of Plant Science and Technology,Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070,China |
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| Keywords: | |
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