| 玉米TRV-VIGS的优化与顶腐病抗病基因的鉴定 |
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| 引用本文： | 李聪聪,安晓晖,张中起,刘康,孙敬.玉米TRV-VIGS的优化与顶腐病抗病基因的鉴定[J].核农学报,2019,33(11):2111-2118. |
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| 作者姓名： | 李聪聪 安晓晖 张中起 刘康 孙敬 |
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| 作者单位： | 南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095;南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095;南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095;南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095;南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室,江苏南京,210095 |
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| 基金项目： | 中央高校基本科研业务费专项资金(KYZ201202-2) |
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| 摘 要： | 烟草脆裂病毒(TRV)介导的基因沉默方法简便易行,但在常规试验条件下按照报道的方法操作沉默玉米基因的效率较低,难以实际应用。为了优化TRV-VIGS体系,并鉴定顶腐病抗病基因,本研究以玉米八氢番茄红素脱氢酶(PDS)基因为靶基因,构建沉默载体pTRV2-ZmPDS,从浸种处理、农杆菌菌株、真空辅助渗入和共培养时间4个试验因素优化玉米TRV-VIGS体系,提高基因沉默效率。结果表明,无菌水浸泡种子24 h,剥去种皮后用LB4404农杆菌菌株真空渗入处理60 min,再共培养10 h时,全株白化苗占出苗植株总数的25.1%~29.3%,较优化前沉默比率(3.0%)提高了8~10倍。半定量RT-PCR分析表明,与对照和未白化植株相比,白化植株的ZmPDS基因转录水平显著降低。应用优化的TRV-VIGS体系沉默ZmMAC3基因,高抗顶腐病的玉米杂交种先玉335在接种亚粘团镰孢菌后表现出典型的顶腐病病症,表明,与双子叶植物相似,MAC3蛋白是玉米内生免疫和抗病所必需的关键调控因子。综上所述,优化后的TRV-VIGS体系可以应用于玉米基因功能的鉴定。
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| 关 键 词： | 玉米 TRV-VIGS PDS MAC3 真空辅助农杆菌渗入 |
| 收稿时间： | 2018-05-21 |
Optimization of TRV-VIGS System and Identification of Top Rot Resistance Related Genes in Maize |
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| LI Congcong,AN Xiaohui,ZHANG Zhongqi,LIU Kang,SUN Jing.Optimization of TRV-VIGS System and Identification of Top Rot Resistance Related Genes in Maize[J].Acta Agriculturae Nucleatae Sinica,2019,33(11):2111-2118. |
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| Authors: | LI Congcong AN Xiaohui ZHANG Zhongqi LIU Kang SUN Jing |
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| Institution: | National Key Laboratory of Crop Genetics and Germplasm Enhancement, Nanjing Agricultural University, Nanjing, Jiangsu 210095 |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | maize TRV-VIGS PDS MAC3 vacuum-assisted Agrobacterium infiltration |
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