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胡杨PeXTH基因的克隆及其转基因烟草的抗镉性分析
引用本文:韩彦莎,鲁彦君,于 瑞,等.胡杨PeXTH基因的克隆及其转基因烟草的抗镉性分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2014,42(1):37-45,50.
作者姓名:韩彦莎  鲁彦君  于 瑞  
作者单位:北京林业大学 生物科学与技术学院;北京林业大学 生物科学与技术学院;北京林业大学 生物科学与技术学院
基金项目:国家自然科学基金项目(31270654,31170570,31200470);北京市自然科学基金项目(6112017);北京市优秀博士学位论文指导教师专项基金项目(YB20081002201);高等学校学科创新引智计划项目(B13007);中央高校基本科研业务费专项(JC2011-2,TD-2012-04)
摘    要:【目的】克隆胡杨木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,并研究该基因和植物抗Cd2+性之间的关系。【方法】利用RT-PCR方法从胡杨中克隆一个木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶基因PeXTH,将该基因的全长cDNA克隆到植物表达载体pGreen0029上,然后通过农杆菌介导法,将重组表达载体转入烟草,并对转基因烟草的抗Cd2+能力进行初步分析。【结果】PeXTH基因的开放阅读框(ORF)长867bp,含ATG起始密码子和TAG终止密码子,编码由288个氨基酸组成的蛋白;多重氨基酸序列比对结果显示,PeXTH蛋白含有木葡聚糖内转糖苷酶/水解酶(XTHs)的保守催化活性域DEIDFEFLG和N-糖基化位点NLSG;Real-Time PCR检测结果表明,PeXTH基因已经成功在2个转基因株系(L6和L14)中过表达;Cd2+胁迫后,转基因烟草根组织中积累的Cd2+含量显著高于野生型,而叶组织中积累的Cd2+含量明显低于野生型;Cd2+胁迫下,转基因烟草叶片的相对电导率显著低于野生型,但抗氧化酶活性、营养元素含量、叶片净光合速率和蒸腾速率等生理指标都要明显高于野生型。【结论】PeXTH基因的过表达提高了烟草对Cd2+的抗性,为进一步深入研究PeXTH基因在植物抗Cd2+机制中的作用奠定了良好基础。

关 键 词:胡杨  烟草  PeXTH  Cd2+  抗Cd2+
收稿时间:2013/1/25 0:00:00

Cloning of Populus euphratica PeXTH gene and its effect on Cd2+ tolerance of transgenic tobacco
HAN Yan-sh,LU Yan-jun and YU Rui,et al.Cloning of Populus euphratica PeXTH gene and its effect on Cd2+ tolerance of transgenic tobacco[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2014,42(1):37-45,50.
Authors:HAN Yan-sh  LU Yan-jun and YU Rui  
Abstract:
Keywords:Populus euphratica  tobacco  PeXTH  Cd2+  Cd2+ tolerance
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