| 香蕉果实采后抑制差减文库的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 徐碧玉,苏伟,金志强.香蕉果实采后抑制差减文库的构建与鉴定[J].分子植物育种,2005,3(4):499-502. |
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| 作者姓名： | 徐碧玉 苏伟 金志强 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,热带作物生物技术国家重点实验室,海口,571101 |
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| 基金项目： | 海南省普通高校优秀中青年教师科研与教学奖励基金 |
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| 摘 要： | 抑制差减杂交技术(suppression subtracfive hybridization，SSH)，是抑制PCR与差减杂交技术相结合而产生的。其优点是在差减杂交过程中使不同丰度cDNA的拷贝数差异趋于均衡，因此不同丰度的差异表达基因都能得到有效克隆，能有效分离低丰度的差异表达基因，避免了表达序列标签分析中高丰度基因重复测序的缺点。因此SSH技术被应用于植物差异表达基因的分离。香蕉果实采后成熟过程中发生一系列复杂的生理变化，这些变化涉及到许多基因的表达。为了研究香蕉果实采后与采前在基因表达上的差异，我们首次采用抑制缩减文库的方法，以分离香蕉果实在采后表达的基因。以采后0h的香蕉果实cDNA为驱动子，对香蕉果实采后48h果实cDNA为待测子，进行抑制缩减杂交，抑制缩减杂交产物与pGEM—TEasy Vecter连接，转化E．coli DH5α，构建了抑制缩减文库。该文库共包含312个克隆，采用PCR方法对文库进行了重组子的鉴定，共有302个重组子。该文库的构建成功为深入研究香蕉果实采后基因的表达奠定了基础，为研究香蕉果实采后成熟的分子生物学机理提供了一个新的思路。
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| 关 键 词： | 抑制差减杂交 差异表达基因 香蕉果实 |
Construction of Differentially Expressed cDNA Library of Banana Fruit by Using Suppression Subtractive Hybridization |
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| Xu Biyu,Su Wei,Jin Zhiqiang.Construction of Differentially Expressed cDNA Library of Banana Fruit by Using Suppression Subtractive Hybridization[J].Molecular Plant Breeding,2005,3(4):499-502. |
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| Authors: | Xu Biyu Su Wei Jin Zhiqiang |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | suppression subtractive hybridization(SSH) Differentially expressed gene Banana(M AAA Group Cavendish) fruit |
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