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马传染性贫血病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建
引用本文:王柳,童光志,仇华吉,谷守林,涂亚斌,杨志彪.马传染性贫血病毒弱毒疫苗株感染性分子克隆的构建[J].中国农业科学,2003,36(12):1560-1565.
作者姓名:王柳  童光志  仇华吉  谷守林  涂亚斌  杨志彪
作者单位:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
基金项目:国家 8 6 3计划 ( 2 0 0 1AA2 2 30 4 1 ),国家自然科学基金 ( 30 1 70 70 6 ),中国博士后科学基金资助项目
摘    要: 采用PCR方法分 3段扩增出马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株 (EIAVDLA)的前病毒DNA ,这 3个片段覆盖马传染性贫血病毒的全部基因组 ,PCR产物经克隆后顺次连接 ,获得 1个含有EIAV全基因 (8.0kb)的重组质粒 ,将其命名为p8.0。将此 8.0kbEIAV全基因再亚克隆到含有一完整EIAVDLA株长末端重复序列的质粒中 ,获得一含有EIAV驴白细胞弱毒前病毒全基因的重组质粒 ,将其命名为p8.2 ,经核苷酸序列分析 ,证明p8.2含有EIAV前病毒的全基因。用p8.2转染驴白细胞 ,将其作为种毒进行传代 ,于感染该克隆毒的细胞培养上清中检测出了反转录酶活性 ,说明在驴白细胞中由p8.2衍生出了EIA病毒。驴白细胞经该克隆毒感染后 ,第 4天出现病变 ,经透射电镜可观察到典型的马传染性贫血病毒粒子 ,进一步证明p8.2具有感染性 ,笔者获得了马传染性贫血病毒驴白细胞弱毒疫苗株的感染性分子克隆 ,为进一步在分子水平上阐明我国EIAV疫苗株的减毒机理和免疫保护机制奠定了基础

关 键 词:马传染性贫血病毒  驴白细胞弱毒疫苗株  感染性分子克隆
修稿时间:2002年7月1日

Infectious Molecular Clone Derived from Equine Infectious Anemia Virus Chinese Donkey Leukocyte Attenuated Strain
WANG Liu,TONG Guang-zhi,QIU Hua-ji,GU Shou-lin,TU Ya-bin,YANG Zhi-biao.Infectious Molecular Clone Derived from Equine Infectious Anemia Virus Chinese Donkey Leukocyte Attenuated Strain[J].Scientia Agricultura Sinica,2003,36(12):1560-1565.
Authors:WANG Liu  TONG Guang-zhi  QIU Hua-ji  GU Shou-lin  TU Ya-bin  YANG Zhi-biao
Abstract:
Keywords:Equine infectious anemia virus  Chinese donkey leukocyte attenuated strain  Infectious molecular clone
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