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| 黄瓜液泡膜H+-PPass基因CuPPase的cDNA克隆、序列分析与表达 | |
| 引用本文： | 洪艳艳,史庆华,王秀峰,窦宏伟,王双双,刘泽洲.黄瓜液泡膜H+-PPass基因CuPPase的cDNA克隆、序列分析与表达[J].园艺学报,2010,37(3):413-420. |
| 作者姓名： | 洪艳艳 史庆华 王秀峰 窦宏伟 王双双 刘泽洲 |
| 作者单位： | 1. 山东农业大学园艺科学与工程学院,山东,泰安,271018 2. 山东农业大学园艺科学与工程学院,山东,泰安,271018;作物生物学国家重点实验室,山东,泰安,271018 3. 山东农业大学林学院,山东,泰安,271018 |
| 基金项目： | 国家'973'项目，国家自然科学基金，中国博士后科学基金 |
| 摘 要： | 利用GenBank 登录的植物液泡膜焦磷酸酶氨基酸保守区序列设计简并引物,利用RT-PCR 和RACE-PCR 技术从黄瓜叶片中获得了一个液泡膜H+-PPase 基因，命名为CuPPase，GenBank 注册号为GQ223786。CuPPase 蛋白与南瓜、绿豆同源性最高，分别为94%，92%。生物信息学分析表明，该基因全长2 650 bp，开放阅读框（ORF）2 307 bp，编码768 个氨基酸；CuPPase 蛋白大小约80 kD，理论pI值为5.32。该基因有14 个强的跨膜螺旋结构，PlantCare 分析结果显示该基因序列具有脱落酸诱导、生长素诱导、赤霉素诱导、水杨酸诱导、低温诱导、干旱诱导的顺式作用元件。RT-PCR 表明，CuPPase 在叶和根中表达较高，茎中表达较低。CuPPase表达受盐胁迫以及高温、低温胁迫诱导，但与处理时间有密切关系，其表达均表现先升高后降低的趋势。 |
| 关 键 词： | 黄瓜 cDNA 克隆 序列分析 表达 |
Cloning,Characterization and Expression of a H~+-PPase Gene CuPPase from Cucumis sativus L. |
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| HONG Yan-yan,SHI Qing-hua,WANG Xiu-feng,DOU Hong-wei,WANG Shuang-shuang,LIU Ze-zhou.Cloning,Characterization and Expression of a H~+-PPase Gene CuPPase from Cucumis sativus L.[J].Acta Horticulturae Sinica,2010,37(3):413-420. | |
| Authors: | HONG Yan-yan SHI Qing-hua WANG Xiu-feng DOU Hong-wei WANG Shuang-shuang LIU Ze-zhou |
| Institution: | HONG Yan-yan1,SHI Qing-hua1,2,WANG Xiu-feng1,DOU Hong-wei3,WANG Shuang-shuang1,, LIU Ze-zhou1 (1College of Horticulture Science , Engineering,Sh,ong Agricultural University,Tai\'an,Sh,ong 271018,China,2State Key Laboratory of Crop Biology,3College of Forestry,China) |
| Abstract: | Using PCR degenerate primers designed based on the conserved amino acid sequences of known tonoplast H+-PPase to amplify cDNA fragments from cucumber by RT-PCR and RACE-PCR,a H+-PPase gene named CuPPase was cloned.The CuPPase protein showed 94%,92% similarity to the H+-PPases from Cucurbita moschata and Vigna radiata.Bioinformatics analysis indicated that the full-length cDNA sequence was 2 650 bp,which contained an open reading frame of 2307 bp and encoded a protein of 768 amino acid residues with a calcul... |
| Keywords: | cucumber cDNA cloning sequence analysis expression |
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