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高粱转录因子SbWRKY71基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达分析
引用本文:杜巧丽,蒋君梅,陈美晴,方远鹏,李向阳,任明见,谢鑫.高粱转录因子SbWRKY71基因的克隆及其在逆境胁迫下的表达分析[J].核农学报,2021,35(7):1532-1539.
作者姓名:杜巧丽  蒋君梅  陈美晴  方远鹏  李向阳  任明见  谢鑫
作者单位:1贵州大学农学院农业微生物特色重点实验室,贵州 贵阳 550025; 2国家小麦改良中心贵州分中心,贵州 贵阳 550025; 3贵州大学绿色农药与农业生物工程教育部重点实验室,贵州 贵阳 550025
基金项目:国家自然科学基金(32060614、31801691),贵州省科技计划(黔科合支撑[2019]2408号),贵州省高层次留学人才创新创业择优资助项目[(2018)02号],贵州省科技计划(黔科合平台人才[2018]5781号)
摘    要:为了探究WRKY转录因子在植物抵抗逆境胁迫方面的重要作用,本研究通过基因克隆的方法,从高粱BTx623中克隆得到一个WRKY转录因子基因(SbWRKY71),该转录因子基因全长1 335 bp(phytozome登录号:Sb04g005520),编码364个氨基酸,分子量为38.95 kDa;预测该转录因子定位于细胞核,具有WRKY转录因子典型的保守结构域,且该蛋白属于WRKY蛋白家族的第Ⅱ组成员。系统进化树分析表明,高粱SbWRKY71氨基酸序列与禾本科作物玉米ZmWRKY71的亲缘关系最近,为75%;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测表明,SbWRKY71基因表达具有组织特异性,在叶中表达丰度最高,茎中最低。经激素水杨酸(SA,1 mmol·L-1)、吲哚-3-乙酸(IAA,10 μmol·L-1)和脱落酸(ABA,200 μmol·L-1)处理后,SbWRKY71的表达量呈现先下降后升高再下降的趋势;在γ-氨基丁酸(GABA)和甘露醇(D-Mannitol,300 mmol·L-1)模拟干旱胁迫以及氯化钠(NaCl,250 mmol·L-1)盐胁迫处理下,SbWRKY71的表达量均先升后降,分别在3、6和9 h达到最大值;高粱经病原相关分子模式(PAMPs)flg22(100 nmol·L-1)、翻译延长因子(elf18,100 nmol·L-1)处理后,SbWRKY71表达均受到抑制,但在几丁质(Chitin,8 nmol·L-1)处理下,SbWRKY71受到诱导表达。本研究为进一步探索SbWRKY71基因在调节高粱抗性、响应激素以及逆境胁迫应答等过程中的作用机制提供了基础。

关 键 词:高粱  SbWRKY71  基因克隆  生物信息学分析  表达分析  
收稿时间:2020-09-18
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