| 半滑舌鳎RasGRP3基因的克隆和免疫应答分析 |
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| 引用本文： | 陈学杰,陈亚东,于孟君,孙璐明,杨光,沙珍霞.半滑舌鳎RasGRP3基因的克隆和免疫应答分析[J].中国水产科学,2016,23(4):813-822. |
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| 作者姓名： | 陈学杰 陈亚东 于孟君 孙璐明 杨光 沙珍霞 |
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| 作者单位： | 1. 中国水产科学研究院黄海水产研究所，农业部海洋渔业可持续发展重点实验室，山东青岛 266071; 上海海洋大学水产与生命学院，上海 201306;2. 中国水产科学研究院黄海水产研究所，农业部海洋渔业可持续发展重点实验室，山东青岛 266071; 青岛海洋科学与技术国家实验室，海洋渔业科学与食物产出过程功能实验室，山东青岛 266200;3. 中国水产科学研究院黄海水产研究所，农业部海洋渔业可持续发展重点实验室，山东青岛 266071; 大连海洋大学水产与生命学院，辽宁大连 116023 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(31572644);国家863计划项目(2012AA10A401-4);鳌山科技创新计划(2015ASKJ02-03) |
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| 摘 要： | RasGRP3(Ras Guanyl nucleotide Releasing Protein 3)是一种鸟苷酸交换蛋白,差异表达的Ras GRP3蛋白在疾病发生和固有免疫中发挥着重要作用。为了探究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)Ras GRP3基因组成、组织表达及免疫应答特征,根据本实验室半滑舌鳎转录组数据获得的部分Ras GRP3序列,采用RACE(Rapid-Amplification of c DNA Ends)技术,克隆了Ras GRP3基因的全长,将测序结果进行氨基酸序列比对和同源性分析:半滑舌鳎Ras GRP3基因全长2756 bp,ORF(Open Reading Frame)长度为2244 bp,编码747个氨基酸;推导的半滑舌鳎Ras GRP3氨基酸序列与其他鱼类的Ras GRP3氨基酸序列相似性较高,是同源基因。采用q RT-PCR(Quantitative Real-Time PCR)方法对Ras GRP3基因在健康半滑舌鳎13种组织、鳗弧菌(Vibro anguillarum)感染后不同时间点的6种免疫组织及LPS、PGN、WGP和poly I:C 4种病原模拟物处理的半滑舌鳎外周血淋巴细胞不同时间点中的表达特征进行分析:Ras GRP3基因在健康半滑舌鳎13种组织中均有表达,其中在性腺中表达量最高,其次是肝、脑和脾,在血液中表达量最低;Ras GRP3基因在鳗弧菌感染后半滑舌鳎6种免疫组织中都表现出不同的表达趋势,其中肝和鳃中上调趋势明显,6 h比0 h上调表达倍数分别为3倍和30倍,在肠、脾、头肾和血液中6 h都出现了下调表达;Ras GRP3在4种病原模拟物处理的半滑舌鳎外周血淋巴细胞中整体上调表达,在PGN和poly I:C这2种病原模拟物刺激后表达趋势出现明显上调,在PGN刺激后24 h比0 h上调表达倍数为13倍,在poly I:C刺激后6 h比0 h上调表达8倍。结果表明,Ras GRP3基因参与了半滑舌鳎的免疫应答过程,可能在免疫调控中发挥着重要的作用。
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| 关 键 词： | 半滑舌鳎 RasGRP3 基因克隆 病源感染 基因表达 |
| 修稿时间： | 2016/7/21 0:00:00 |
Cloning and immune response analysis of the RasGRP3 gene in Cynoglossus semilaevis |
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| CHEN Xuejie,CHEN Yadong,YU Mengjun,SUN Luming,YANG Guang,SHA Zhenxia.Cloning and immune response analysis of the RasGRP3 gene in Cynoglossus semilaevis[J].Journal of Fishery Sciences of China,2016,23(4):813-822. |
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| Authors: | CHEN Xuejie CHEN Yadong YU Mengjun SUN Luming YANG Guang SHA Zhenxia |
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| Institution: | CHEN Xuejie;CHEN Yadong;YU Mengjun;SUN Luming;YANG Guang;SHA Zhenxia;Key Laboratory for Sustainable Development of Marine Fisheries, Ministry of Agriculture;Yellow Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences;College of Fisheries and Life Science, Shanghai Ocean University;Laboratory for Marine Fisheries and Aquaculture, Qingdao National Laboratory for Marine Science and Technology;College of Fisheries and Life Science, Dalian Ocean University; |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Cynoglossus semilaevis RasGRP3 gene cloning pathogenic infection gene expression |
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