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阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响
引用本文:朱纯霄,孙睿,张焱如,张东,刘春霞,孟凡华.阿拉善双峰驼ENaCα亚基基因克隆及激素对肾皮质细胞中该基因表达的影响[J].中国畜牧兽医,2019,46(2):338-344.
作者姓名:朱纯霄  孙睿  张焱如  张东  刘春霞  孟凡华
作者单位:内蒙古农业大学生命科学学院, 呼和浩特 010018
基金项目:内蒙古自治区自然科学基金项目(2016MS0349)
摘    要:为探究阿拉善双峰驼上皮细胞钠通道的作用特点,试验采用深圳华大公司提供的ENaCα亚基基因片段序列设计PCR引物,提取阿拉善双峰驼肾皮质总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增获得双峰驼ENaCα亚基基因,构建克隆质粒pMD19-T-ENaCα,对重组质粒进行双酶切和测序分析;采集双峰驼肾皮质部分,细胞体外培养到P3代后,加入不同浓度的醛固酮(aldosterone)和血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ),实时荧光定量PCR技术检测细胞中ENaCα亚基基因的表达情况,以确定ENaCα对两种激素浓度变化的敏感性。结果显示,PCR扩增得到2.2 kb的特异性条带,SmaⅠ和PstⅠ双酶切得到2.2和2.7 kb的条带,表明重组质粒pMD19-T-ENaCα构建成功。实时荧光定量PCR结果显示,1×10-9 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ处理的双峰驼肾皮质细胞的ENaCα表达量显著高于对照组(P<0.05);1×10-6、1×10-7和1×10-8 mol/L醛固酮和血管紧张素Ⅱ表达量显著低于对照组(P<0.05)。本研究结果为揭示双峰驼水盐代谢的生理机制提供了试验依据。

关 键 词:阿拉善双峰驼  上皮细胞钠通道  醛固酮  血管紧张素Ⅱ  
收稿时间:2018-06-29

Cloning of ENaCα Subunit Gene from Alax League Bactrian Camel and Effect of Hormone on the ENaCα Expression of Renal Cortex Cells
ZHU Chunxiao,SUN Rui,ZHANG Yanru,ZHANG Dong,LIU Chunxia,MENG Fanhua.Cloning of ENaCα Subunit Gene from Alax League Bactrian Camel and Effect of Hormone on the ENaCα Expression of Renal Cortex Cells[J].China Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2019,46(2):338-344.
Authors:ZHU Chunxiao  SUN Rui  ZHANG Yanru  ZHANG Dong  LIU Chunxia  MENG Fanhua
Institution:College of Life Science, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China
Abstract:
Keywords:Alax League Bactrian camel  epithelial sodium channel  aldosterone  angiotensin Ⅱ  
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