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猪流行性腹泻病毒AH-2018-HF1株全基因组序列测定与分析
引用本文:孙 裴,王震震,李 亮,等.猪流行性腹泻病毒AH-2018-HF1株全基因组序列测定与分析[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2021,49(4):,1-,9.
作者姓名:孙 裴  王震震  李 亮  
作者单位:安徽农业大学 动物科技学院;南京农业大学 动物医学院
基金项目:合肥市农业行业首席专家工作室(生猪饲养及疫防)项目;现代农业产业技术体系建设专项(CARS-36-生猪);安徽省生猪产业技术体系项目;农业农村部猪肉质量安全控制重点实验室项目;安徽省自然科学基金项目(1708085MC83)
摘    要:【目的】对猪流行性腹泻病毒安徽毒株AH-2018-HF1进行全基因组测序,了解该毒株的分子生物学特征和遗传进化情况,为PEDV的进化和变异研究提供参考。【方法】从PEDV阳性病料(肠道组织)中提取RNA,反转录获得cDNA。将PEDV基因分为9段,设计相应的引物,采用分段重叠法对PEDV基因组进行分段扩增,扩增产物经克隆测序后,采用DNAstar软件拼接,获得全基因组,将此全基因序列与GenBank上公布的国内外25株PEDV毒株进行比对和分析。【结果】PCR扩增获得了4 036,3 724,2 874,3 600,3 950,4 187,3 576,2 953和1 138 bp的9条目标片段,测序拼接后获得了27 937 bp的PEDV全长基因组。AH-2018-HF1株与经典株CV777(疫苗株)全基因序列同源性为97.7%,S基因同源性为96.7%,ORF3基因同源性为90.8%。全基因组序列对比发现,AH-2018-HF1株与SD-M株同源性最高,为99.9%;与PEDV/MEX/QRO/02/2017同源性最低,为96%。S基因序列分析结果显示,AH-2018-HF1株在2 319-2 320位缺失3 bp碱基(GTT);与CV777、LZC株相比,AH-2018-HF1株在459-460位缺失3 bp碱基(ATA);和国内外变异毒株相比,AH-2018-HF1株在174-175位缺失12 bp 碱基(CAGGGTGTCAAT),在461-462位插入6 bp碱基(TGGAAA)。ORF3基因序列分析结果显示,AH-2018-HF1株在245-296位有49个碱基缺失。全基因组系统进化树分析表明,AH-2018-HF1与SD-M亲缘性最近,与CV777亲缘性较近,与国内外变异毒株的亲缘关系较远;S基因系统进化结果与全基因组系统进化结果相似;ORF3基因系统进化分析结果与全基因组系统进化结果不同。【结论】AH-2018-HF1仍属于经典毒株,但存在一定的变异,表明PEDV处于不断的进化中。

关 键 词:猪流行性腹泻病毒  全基因组  序列分析  安徽省
收稿时间:2020/3/25 0:00:00
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