| 鸡HMIT基因的克隆与表达分析 |
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| 引用本文： | 杜鹏飞,陈博,高林歌,朱瑶,张向丽,朱星浩,陈文,黄艳群.鸡HMIT基因的克隆与表达分析[J].畜牧兽医学报,2020,51(8):1811-1822. |
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| 作者姓名： | 杜鹏飞 陈博 高林歌 朱瑶 张向丽 朱星浩 陈文 黄艳群 |
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| 作者单位： | 河南农业大学 饲料营养河南省工程实验室, 郑州 450002 |
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| 基金项目： | 智汇郑州.1125聚才计划-创新领军人才项目 |
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| 摘 要： | 旨在克隆鸡H+/肌醇转运蛋白（H+/myoinositol transporter，HMIT）基因的转录序列，并检测HMIT基因在鸡不同组织中的表达情况，以及外源胰岛素处理对HMIT基因相对表达量的影响。本研究以AA肉鸡为试验动物，采用RT-PCR技术克隆鸡HMIT基因全编码区序列，采用生物信息学技术分析其编码蛋白的生物学特性，利用荧光定量PCR检测HMIT基因在大脑、肝、腹脂、腿肌、心、肾、空肠和回肠等组织中的表达情况，并检测其在肾和大脑中进行胰岛素处理120和240 min后的表达情况。结果表明，以NCBI预测的鸡HMIT（XM_001232939.5）序列为模板设计引物，成功克隆出鸡HMIT基因（1 694 bp，GenBank登录号：MN708211）。克隆的鸡HMIT编码区全长1 380 bp，相比XM_001232939.5预测的编码序列少561 bp，预测编码含有459个氨基酸组成的蛋白。核苷酸和氨基酸序列比对发现，鸡HMIT在物种间高度同源，共线性分析显示，HMIT所在的1号染色体区域在物种间也是高度保守的。HMIT编码的蛋白质是一种不稳定的亲水性蛋白质，其二级结构和三级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主。跨膜结构分析显示，鸡HMIT存在8个明显的跨膜结构域。亚细胞定位结果表明，鸡HMIT蛋白分布于质膜（52.3%）、内质网（21.7%）、液泡（17.4%）、线粒体（4.3%）和高尔基体（4.3%）。实时荧光定量PCR检测结果显示，HMIT基因在鸡大脑和肾表达量最高，且显著高于其他组织（P<0.05）。胰岛素处理240 min后，HMIT在肾和大脑中的表达量都显著低于PBS对照组（P<0.05）。本研究克隆获得了鸡HMIT的全编码区，生物信息学分析及组织表达特性研究为深入探索鸡HMIT基因的生理功能和调控机制奠定基础。
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| 关 键 词： | HMIT 基因克隆 生物信息学分析 组织表达 胰岛素 |
| 收稿时间： | 2019-12-16 |
Cloning and Expression Analysis of Chicken HMIT Gene |
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| DU Pengfei,CHEN Bo,GAO Lin'ge,ZHU Yao,ZHANG Xiangli,ZHU Xinghao,CHEN Wen,HUANG Yanqun.Cloning and Expression Analysis of Chicken HMIT Gene[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2020,51(8):1811-1822. |
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| Authors: | DU Pengfei CHEN Bo GAO Lin'ge ZHU Yao ZHANG Xiangli ZHU Xinghao CHEN Wen HUANG Yanqun |
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| Institution: | Feed Nutrition Engineering Laboratory of Henan Province, Henan Agricultural University, Zhengzhou 450002, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HMIT gene cloning bioinformatics analysis tissue expression insulin |
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