| 甘蔗花叶病和宿根矮化病多重PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 张显勇,蔡文伟,杨本鹏,张树珍,王业桥.甘蔗花叶病和宿根矮化病多重PCR检测方法的建立[J].中国农业科学,2008,41(12):4321-4327. |
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| 作者姓名： | 张显勇 蔡文伟 杨本鹏 张树珍 王业桥 |
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| 作者单位： | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 |
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| 摘 要： | 【目的】建立能同时检测甘蔗花叶病（sugarcane mosaic virus，SCMV）和宿根矮化病（ratoon stunting disease，RSD）的多重PCR检测方法。【方法】以病株带鞘叶组织总核酸反转录物为模板，根据中国甘蔗花叶病的主要致病病原高梁花叶病毒SrMV和甘蔗花叶病毒中国大陆优势株系SCMV-A，结合B、D、E和SC株系的外壳蛋白核苷酸序列的保守区设计PCR引物对和已有的检测甘蔗宿根矮化病病原木质部赖氏杆菌木质部亚种（Leifsonia xyli subsp. Xyli，Lxx）的PCR引物对，在SCMV RT-PCR和RSD单一PCR体系的基础上，建立并优化可同时检测SCMV和RSD的多重PCR检测方法。【结果】此检测方法可特异地从感染SCMV和RSD的样品中扩增出SCMV（400 bp）和RSD（265 bp）2个条带，扩增产物测序结果表明，SCMV扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为81%～99%，RSD扩增产物与GenBank中其它株系或分离物的核苷酸序列同源性为91%～99%。【结论】应用此检测方法可稳定、特异地检测出蔗株中是否有导致甘蔗花叶病和宿根矮化病的单一或混合的病原。
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| 关 键 词： | 甘蔗花叶病毒 甘蔗宿根矮化病 RT-PCR 病原检测 多重PCR |
| 收稿时间： | 2007-12-20 |
Development of a Multiplex PCR Protocol for the Detection of SCMV and Clavibacter xyli subsp. Xyli,lxx,the Causal Bacterium of Sugarcane RSD |
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| ZHANG Xian-yong,CAI Wen-wei,YANG Ben-peng,ZHANG Shu-zhen,WANG Ye-qiao.Development of a Multiplex PCR Protocol for the Detection of SCMV and Clavibacter xyli subsp. Xyli,lxx,the Causal Bacterium of Sugarcane RSD[J].Scientia Agricultura Sinica,2008,41(12):4321-4327. |
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| Authors: | ZHANG Xian-yong CAI Wen-wei YANG Ben-peng ZHANG Shu-zhen WANG Ye-qiao |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Sugarcane Sugarcane mosaic virus(SCMV) Sugarcane ratoon stunting disease(RSD) RT-PCR Pathogen detection multiplex PCR |
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