| 小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定 |
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| 引用本文： | 李伟,李刚,邱文英,贾凤芹,曾妮,吴素丽.小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定[J].中国预防兽医学报,2009,31(2). |
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| 作者姓名： | 李伟 李刚 邱文英 贾凤芹 曾妮 吴素丽 |
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| 作者单位： | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京,100193 |
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| 基金项目： | 国家科技支撑计划，引进国际先进农业科学技术计划(948计划)，FAO/IAEA项目 |
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| 摘 要： | 根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株的H基因序列,设计上下游引物并添加BamH I酶切位点,以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo-PPRVH质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆于pEASY-T载体中,用BamH I单酶切后将目的片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,核酸序列分析证明.成功构建了PPRV H原核表达质粒pET-32a-H.将pET-32a-H重组质粒转化大肠杆茵 BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE电泳,可见H蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为87 Ku,表达产物以包涵体的形式存在,其表达量达到茵体总蛋白的38%,占包涵体蛋白的80%以上.Western blot鉴定表明,所表达的重组蛋白能被抗组氨酸单抗、抗PPRV标准阳性羊血清及抗PPRV疫苗的羊血清所识别,具有良好的免疫原性.
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| 关 键 词： | 小反刍兽疫病毒 H基因 原核表达 |
Prokaryotic expression of peste des petits ruminants virus H gene |
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| LI Wei,LI Gang,QiU Wen-ying,JIA Feng-qin,ZENG Ni,WU Su-li.Prokaryotic expression of peste des petits ruminants virus H gene[J].Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine,2009,31(2). |
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| Authors: | LI Wei LI Gang QiU Wen-ying JIA Feng-qin ZENG Ni WU Su-li |
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