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苹果愈伤组织SSR-PCR反应体系优化
引用本文:高兵,安文杰,孙俊.苹果愈伤组织SSR-PCR反应体系优化[J].北方园艺,2018(10):53-56.
作者姓名:高兵  安文杰  孙俊
作者单位:山西林业职业技术学院园艺系,山西太原030009;南京农业大学园艺学院,江苏南京210095;山西林业职业技术学院园艺系,山西太原,030009;南京农业大学园艺学院,江苏南京210095;安徽农业大学园艺学院,安徽合肥230036
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30200190),港澳台科技合作专项资助项目(2015DFT30090)
摘    要:以"嘎啦"苹果组培苗叶片诱导的愈伤组织作为DNA模板提取材料,采用正交设计,摸索了SSR反应体系中Mg~(2+)、Taq DNA聚合酶、引物、模板DNA、dNTP的最适浓度,可为苹果愈伤组织的遗传变异研究奠定基础。结果表明:各因素不同水平变化对反应体系的影响为Taq DNA聚合酶dNTP用量Mg~(2+)用量引物用量=模板DNA浓度。确立了苹果愈伤组织SSR-PCR最佳反应体系总体积25μL,其中4μL 25mmol·L~(-1) Mg~(2+),0.25μL 5U·μL~(-1) Taq DNA聚合酶,3μL 0.01mmol·L~(-1) SSR引物,1μL 30ng·μL~(-1)模板DNA,4μL 2.5mmol·L~(-1)dNTP,2.5μL 10×PCR Buffer,10.25μL超纯水。

关 键 词:苹果  愈伤组织  SSR-PCR  体系优化

Optimization of SSR-PCR Reaction System for Apple Callus
GAO Bing,AN Wenjie,SUN Jun.Optimization of SSR-PCR Reaction System for Apple Callus[J].Northern Horticulture,2018(10):53-56.
Authors:GAO Bing  AN Wenjie  SUN Jun
Abstract:
Keywords:
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