塞内卡病毒A VP1基因原核表达及蛋白纯化 |
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引用本文: | 贺大芳,邱文英,陈奕帆,邹瑶,王德.塞内卡病毒A VP1基因原核表达及蛋白纯化[J].养猪,2020(1):98-101. |
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作者姓名: | 贺大芳 邱文英 陈奕帆 邹瑶 王德 |
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作者单位: | 华派生物工程集团有限公司 |
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摘 要: | 试验以猪塞内卡病毒A(SVA)VP1基因为研究对象,利用基因重组技术构建原核表达载体pET-28a(+)-VP1。重组质粒转化E.coli BL21(DE3)后经1 mmol/L异丙基茁-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在37益条件下诱导6 h,后经15%十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺(SDS-PAGE)凝胶电泳进行检测。结果:SVAVP1基因能在BL21(DE3)中成功表达,融合蛋白相对分子质量约36 kDa;表达的融合蛋白以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,以包涵体为主要存在形式。以上研究结果为后续SVAVP1蛋白的免疫原性的研究及塞内卡病毒病抗体ELISA方法的建立奠定了基础。
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关 键 词: | 塞内卡病毒 VP1基因 原核表达 蛋白纯化 |
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