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草莓植株中病毒dsRNA的分离和鉴定
引用本文:李贺,代红艳,张志宏,高秀岩,杜国栋,张馨宇.草莓植株中病毒dsRNA的分离和鉴定[J].中国农业科学,2006,39(1):145-152.
作者姓名:李贺  代红艳  张志宏  高秀岩  杜国栋  张馨宇
作者单位:沈阳农业大学园艺学院,沈阳,110161
基金项目:中国科学院资助项目;国家留学回国人员科研启动基金
摘    要: 【目的】病毒核酸分离是病毒基因组解析的基础,本研究旨在建立草莓病毒的dsRNA分离方法,获得草莓主要病毒的部分基因组序列。【方法】采用改进的dsRNA分离方法,对草莓病毒指示植物和栽培品种中的病毒dsRNA进行分离,通过琼脂糖凝胶电泳和RT-PCR来鉴定。【结果】不同草莓品种中病毒dsRNA的含量不同,试管苗叶片中dsRNA含量高于露地苗幼叶,而露地苗幼叶中dsRNA含量明显高于完全成熟叶。dsRNA对DNase Ⅰ具有很强的耐性;当酶解缓冲液中含0.5 mol·L-1 NaCl时,dsRNA对RNase A具有较强的耐性。利用DNA凝胶回收试剂盒,能够有效回收凝胶中的dsRNA片段。应用RT-PCR技术,从凝胶回收的dsRNA及DNase Ⅰ/RNase A两酶酶解处理后的dsRNA中分别扩增出草莓斑驳病毒和草莓轻型黄边病毒的特异片段。【结论】建立了从草莓植株中分离和鉴定病毒dsRNA的完整技术体系,为草莓病毒中国分离物的基因组解析奠定了重要基础。

关 键 词:草莓  dsRNA  病毒  分离  RT-PCR
收稿时间:08 1 2005 12:00AM
修稿时间:2005-08-012005-09-28

Isolation and Identification of Virus dsRNA from Strawberry Plants
LI He,DAI Hong-yan,ZHANG Zhi-hong,GAO Xiu-yan,DU Guo-dong,ZHANG Xin-yu.Isolation and Identification of Virus dsRNA from Strawberry Plants[J].Scientia Agricultura Sinica,2006,39(1):145-152.
Authors:LI He  DAI Hong-yan  ZHANG Zhi-hong  GAO Xiu-yan  DU Guo-dong  ZHANG Xin-yu
Abstract:
Keywords:dsRNA  RT-PCR
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