| 犬β-防御素cBD103的原核表达和纯化 |
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| 引用本文： | 朱骞,包银莉,秦海斌,宋珍华,贺星亮,温海,高一龙.犬β-防御素cBD103的原核表达和纯化[J].动物医学进展,2017,38(5). |
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| 作者姓名： | 朱骞 包银莉 秦海斌 宋珍华 贺星亮 温海 高一龙 |
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| 作者单位： | 1. 公安部南京警犬研究所,警犬技术公安部重点实验室,江苏南京210012;2. 南京农业大学动物医学院,江苏南京,210095 |
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| 基金项目： | 江苏省自然科学基金面上项目，公安部应用创新计划项目 |
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| 摘 要： | 将犬β-防御素103(canineβ-defensin 103,cBD103)基因亚克隆至原核表达载体pET-32a(+),构建重组表达质粒pET-cBD103,转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,IPTG诱导表达后,利用Ni-NTA亲和层析纯化该蛋白,并用肠激酶酶切融合蛋白,SDS-PAGE鉴定表达产物和纯化产物。结果表明,质粒pET-cBD103经PCR及双酶切鉴定证明构建正确,大肠埃希菌中成功表达出目的蛋白,蛋白大小约为24ku,以可溶性表达为主。经过纯化和酶切,得到大小8ku的cBD103,与预期大小一致。该研究在大肠埃希菌中表达了目的蛋白,为下一步大规模制备cBD103奠定了基础。
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| 关 键 词： | 犬β-防御素103 原核表达 纯化 |
Prokaryotic Expression and Purification of Canine β-defensin 103 |
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| ZHU Qian,BAO Yin-li,QIN Hai-bin,SONG zhen-hua,HE Xing-liang,WEN Hai,Gao Yi-long.Prokaryotic Expression and Purification of Canine β-defensin 103[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(5). |
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| Authors: | ZHU Qian BAO Yin-li QIN Hai-bin SONG zhen-hua HE Xing-liang WEN Hai Gao Yi-long |
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