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肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法的建立
引用本文:纪雪,张雪,孙洋,孙诗雯,祝令伟,刘军,姜海艳,周伟,梁冰,郭学军,刘彦晶.肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法的建立[J].动物医学进展,2017,38(7).
作者姓名:纪雪  张雪  孙洋  孙诗雯  祝令伟  刘军  姜海艳  周伟  梁冰  郭学军  刘彦晶
作者单位:1. 军事医学科学院军事兽医研究所,吉林省人兽共患病预防与控制重点实验室,吉林长春 130122;2. 长春中医药大学附属医院,吉林长春,130021
基金项目:吉林省自然科学基金项目,武汉市科技计划项目
摘    要:为建立肠出血性大肠埃希菌O157:H7的多重PCR检测方法,针对O157菌特异性eaeA基因、fliC基因、志贺毒素基因(stx1和stx2)及rfbE基因设计5对引物,构建多重PCR反应体系,优化反应的引物浓度和温度检测其特异性和敏感性,并对牛、猪、鸡及犬等不同动物来源的样品进行了大肠埃希菌O157检测。结果显示,该方法具有良好的特异性和敏感性,敏感性达到5×10~3CFU。从检测阳性样本中均分离到目的菌。应用建立的方法在确定样品中是否含有大肠埃希菌O157的同时,还能对菌株毒力进行初步判定。成功建立了肠出血性大肠埃希菌O157:H7多重PCR检测方法,为该病原菌感染的预防和监测提供了简便、快速的技术手段,具有良好的应用前景。

关 键 词:肠出血性大肠埃希菌O157:H7  多重PCR  检测  rfbE基因

Establishment of Multiplex PCR for Detecting Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7
JI Xue,ZHANG Xue,SUN Yang,SUN Shi-wen,ZHU Ling-wei,LIU Jun,JIANG Hai-yan,ZHOU Wei,LIANG Bing,GUO Xue-jun,LIU Yan-jing.Establishment of Multiplex PCR for Detecting Enterohemorrhagic Escherichia coli O157:H7[J].Progress In Veterinary Medicine,2017,38(7).
Authors:JI Xue  ZHANG Xue  SUN Yang  SUN Shi-wen  ZHU Ling-wei  LIU Jun  JIANG Hai-yan  ZHOU Wei  LIANG Bing  GUO Xue-jun  LIU Yan-jing
Abstract:
Keywords:
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