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| 产志贺毒素大肠杆菌stx2基因荧光定量PCR检测方法的建立及应用(英文) | |
| 作者单位： | ;1.江苏省农业科学院兽医研究所;2.农业部兽用生物制品工程技术重点实验室;3.国家兽用生物制品工程技术研究中心;4.安徽医科大学口腔医学院 |
| 摘 要： | 目的]建立检测产志贺毒素性大肠杆菌(STEC)stx2基因荧光定量PCR方法。方法]根据GenBank中已发表的STEC stx2基因序列,在保守区域设计PCR引物和探针,构建重组质粒作为阳性模板,优化反应条件,建立荧光定量PCR方法。结果]利用优化的荧光定量PCR反应体系建立了标准曲线。表明起始模板浓度与Ct值之间线性关系好,相关系数R2均达0.995以上;此方法特异性好,对10种非STEC肠道病菌无特异性扩增;敏感性高,初始模板的检出下限达1.0×102拷贝数/μl;重复性好,批内、指间变异系数均分别小于1%和5%。结论]该研究成功建立了检测STEC stx2基因的荧光定量PCR方法,为快速检测样品中STEC提供了技术手段。 |
| 关 键 词： | 产志贺毒素大肠杆菌 志贺毒素2基因 荧光定量PCR |
Establishment and Application of a Real-time PCR Method for Detecting stx2 Gene in Shiga Toxin-producing Escherichia coli(STEC) |
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