| 传染性胰脏坏死病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用 |
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| 引用本文： | 张 文,徐立蒲,吕晓楠,王小亮,曹 欢,王 姝,王静波,王 澎.传染性胰脏坏死病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J].中国动物检疫,2023,40(4):106-113. |
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| 作者姓名： | 张 文 徐立蒲 吕晓楠 王小亮 曹 欢 王 姝 王静波 王 澎 |
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| 作者单位： | 北京市水产技术推广站 |
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| 基金项目： | 现代农业产业技术体系北京市渔业创新团队项目（BAIC07-2022-09）；国家标准修订项目（IPN诊断规程） |
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| 摘 要： | 传染性胰脏坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)是一种严重危害鲑鳟鱼类的重要传染性病原。为建立IPNV快速检测方法，根据IPNV VP2蛋白编码基因保守序列，设计并筛选出特异性引物和Taq Man探针，并优化筛选引物以及探针检测浓度、退火温度和退火时间，建立了一种实时荧光定量RT-PCR检测方法，并对方法进行了评价。结果显示：该方法灵敏度高，对IPNV的检测限为5 copies/μL；特异性强，对传染性造血器官坏死病毒、鲤春病毒血症病毒、病毒性出血性败血症病毒、草鱼呼肠孤病毒、流行性造血器官坏死病毒等其他病毒核酸扩增均呈阴性；重复性良好，组内与组间重复平均变异系数均小于3%；用本研究建立的实时荧光定量RT-PCR方法，对40份经病毒分离鉴定的样品进行IPNV检测，符合率为100%。结果表明，本研究建立的方法具有快速、特异、敏感等优点，可检测病毒含量较低的组织样品，对于IPNV的快速检测更具优势。
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| 关 键 词： | 传染性胰脏坏死病毒 实时荧光定量RT-PCR TaqMan探针 |
Establishment and Application of a Real-time Fluorescence RT-PCR for Infectious Pancreatic Necrosis Virus |
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