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柑橘黄化脉明病毒RT-LAMP检测方法的建立
引用本文:刘科宏,陈洪明,周彦,李中安.柑橘黄化脉明病毒RT-LAMP检测方法的建立[J].园艺学报,2015,42(5):997-1002.
作者姓名:刘科宏  陈洪明  周彦  李中安
作者单位:西南大学柑桔研究所,重庆 400712
基金项目:国家公益性行业(农业)科研专项(201203076-01);中央高校基本科研业务费项目(XDJK2012C078)
摘    要:柑橘黄脉病由柑橘黄化脉明病毒(Citrus yellow vein clearing virus,CYVCV)引起,是中国近年来新发生的一种柑橘病害。根据CYVCV的外壳蛋白基因序列设计了一组特异性引物,经过一系列条件优化,建立了该病毒的RT-LAMP检测方法。结果显示该方法能特异扩增CYVCV,与其他6种柑橘病原物(柑橘衰退病毒、温州蜜柑萎缩病毒、鳞皮病毒、柑橘裂皮病类病毒、柑橘碎叶病毒和柑橘黄龙病菌)不发生反应;灵敏度为RT-PCR的10倍;田间样品的检出率为63.33%,与RT-PCR的结果一致,适用于田间样品的检测。在产物中加入荧光染料SYBR GreenⅠ直接用肉眼观察就可判断样品是否感染CYVCV,可省去电泳分析的时间。该方法具有特异性强、灵敏度高、操作简单、快速等特点。

关 键 词:柑橘黄化脉明病毒  RT-LAMP  检测  

Establishment of RT-LAMP Assay for Detection of Citrus yellow vein clearing virus
LIU Ke-hong , CHEN Hong-ming , ZHOU Yan , LI Zhong-an.Establishment of RT-LAMP Assay for Detection of Citrus yellow vein clearing virus[J].Acta Horticulturae Sinica,2015,42(5):997-1002.
Authors:LIU Ke-hong  CHEN Hong-ming  ZHOU Yan  LI Zhong-an
Institution:Citrus Research Institute,Southwest University,Chongqing 400712,China
Abstract:
Keywords:Citrus yellow vein clearing virus  RT-LAMP  detection
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