| gutD基因的克隆及植物表达载体的构建 |
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| 引用本文： | 王悦,燕丽萍,夏阳,李阳春,洪春.gutD基因的克隆及植物表达载体的构建[J].山东林业科技,2007(6):39-41. |
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| 作者姓名： | 王悦 燕丽萍 夏阳 李阳春 洪春 |
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| 作者单位： | 1. 甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070;山东省林业科学研究院
2. 山东省林业科学研究院
3. 甘肃农业大学生命科学技术学院,兰州,730070 |
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| 摘 要： | 通过RT-PCR的方法从大肠杆菌K12中扩增出了gutD基因的全长cDNA片段,将其克隆到pMD18 T-vector中,序列分析表明克隆的片段长度为780bp,包含了完整的gutD基因的编码序列,除编码区第61位密码子由CTG变为CGT和第72位密码子CTT变为CCT其它序列与所报道的修正序列一致。以BamHⅠ和HindIII限制性内切酶从克隆载体上切取gutD基因,将其连接在相应酶切的中间载体KS上,再以KpnI和BamHI酶切重组子获得具粘性末端的目的片段(gutD)与植物表达载体pCAMBIA2300连接,重组质粒通过双酶切和PCR鉴定正确后,采用直接转化法将pCAMBIA2300-gutD质粒导入根癌农杆菌LBA4404,并用PCR方法进行了鉴定。
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| 关 键 词： | 6-磷酸山梨醇脱氢酶基因(gutD) 克隆 序列分析 PCR及酶切检测 |
| 文章编号： | 1002-2724（2007）06-0039-03 |
| 收稿时间： | 2007-10-31 |
| 修稿时间： | 2007年10月31 |
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