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| 牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立 | |
| 引用本文： | 周毅,吴玉石,段宏安,张睿,周祖涛,毕丁仁,石德时.牛白血病病毒env(gp51)基因的克隆和原核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立[J].畜牧兽医学报,2009,40(4). |
| 作者姓名： | 周毅 吴玉石 段宏安 张睿 周祖涛 毕丁仁 石德时 |
| 作者单位： | 1. 华中农业大学动物医学院湖北省预防兽医学重点实验室,武汉,430070;连云港出入境检验检疫局,连云港,222042 2. 华中农业大学动物医学院湖北省预防兽医学重点实验室,武汉,430070 3. 连云港出入境检验检疫局,连云港,222042 |
| 基金项目： | 江苏出入境检验检疫局科研项目，湖北省武汉市科技攻关项目 |
| 摘 要： | 从持续感染牛白血病病毒（BLV）的羊胎肾细胞（FLK-BLV）中提取前病毒DNA,用PCR方法扩增编码牛白血病病毒gp51蛋白的env（gp51）基因,序列测定结果表明扩增片段全长828 bp。将扩增基因插入原核表达载体pET-32a构建pET-32a-gp51重组质粒,转化BL21（DE3）进行诱导表达,SDS-PAGE电泳结果表明重组融合蛋白大小约为43 000,Western-blot结果表明重组表达蛋白具有免疫反应性。以纯化的重组蛋白gp51作为抗原,建立检测BLV抗体的间接ELISA诊断方法。结果表明,抗原gp51的最佳包被浓度为2.19μg.mL^-1,血清的最佳稀释倍数为1∶80,阳性判定标准确定为样品OD450 nm大于0.451。用该方法对12份参考血清进行检测,准确率为91.67%。 |
| 关 键 词： | 牛白血病病毒 gp51蛋白 原核表达 间接ELISA |
Cloning and Prokaryotic Expression of Bovine Leukemia Virus env(gp51) Gene and Development of an Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Detecting Antibody against Bovine Leukemia Virus |
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| ZHOU Yi,WU Yu-shi,DUAN Hon-gan,ZHANG Rui,ZHOU Zu-tao,BI Ding-ren,SHI De-shi.Cloning and Prokaryotic Expression of Bovine Leukemia Virus env(gp51) Gene and Development of an Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Detecting Antibody against Bovine Leukemia Virus[J].Acta Veterinaria et Zootechnica Sinica,2009,40(4). | |
| Authors: | ZHOU Yi WU Yu-shi DUAN Hon-gan ZHANG Rui ZHOU Zu-tao BI Ding-ren SHI De-shi |
| Abstract: | |
| Keywords: | |
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