| 广西沼泽型水牛γ-干扰素基因的克隆与原核表达 |
| |
| 引用本文： | 张为宇,郑小龙,阳玉梅,黄维义,石云良.广西沼泽型水牛γ-干扰素基因的克隆与原核表达[J].广西农业生物科学,2007,26(3):210-214. |
| |
| 作者姓名： | 张为宇 郑小龙 阳玉梅 黄维义 石云良 |
| |
| 作者单位： | 1. 广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530905
2. 广西大学,动物科学技术学院,广西,南宁,530905;山东出入境检验检疫局,山东,青岛,266002 |
| |
| 基金项目： | 广西自然科学基金项目(桂科基0448001) |
| |
| 摘 要： | 本研究克隆了广西沼泽型水牛γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)基因,并构建了水牛IFN-γ原核表达质粒。从健康沼泽型水牛静脉无菌采血,分离外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cells,PBMCs),用刀豆素A(Concanavalin A,ConA)诱导培养13 h后,提取细胞总RNA,用水牛IFN-γ基因特异性引物通过RT-PCR扩增水牛IFN-γ成熟肽编码区cDNA序列,将其克隆到pMD18-T载体中。RT-PCR产物电泳可见约457 bp大小目的片段。经过限制性酶切分析,测序证实克隆得到的基因序列正确。将IFN-γ成熟肽编码区基因片段切下亚克隆到表达载体pET-32a 中,构建成重组表达质粒pET-mIFN-γ。PCR、双酶切电泳和序列测定结果均证实已插入约457 bp的IFN-γ基因片段。经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导,水牛IFN-γ基因在大肠杆菌中获得了高效的表达,融合蛋白的分子量为35 ku,表达量占菌体总蛋白的43.6%。
|
| 关 键 词： | 沼泽型水牛 γ-干扰素 基因克隆 原核表达 |
| 文章编号： | 1008-3464（2007）03-0210-05 |
| 收稿时间： | 2006-12-03 |
| 修稿时间： | 2007-05-31 |
Cloning and prokaryotic expression of Guangxi swamp type buffalo interferon-γ gene |
| |
| ZHANG Wei-yu,ZHENG Xiao-long,YANG Yu-mei,HUANG Wei-yi,SHI Yun-liang.Cloning and prokaryotic expression of Guangxi swamp type buffalo interferon-γ gene[J].Journal of Guangxi Agricultural and Biological Science,2007,26(3):210-214. |
| |
| Authors: | ZHANG Wei-yu ZHENG Xiao-long YANG Yu-mei HUANG Wei-yi SHI Yun-liang |
| |
| Institution: | 1.College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China;2.Shandong Entry-Exit Inspection and Quarantine Bureau, Qingdao 266002, China |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 维普 万方数据 等数据库收录！ |
|
