短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究 |
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引用本文: | 吕文平,许梓荣,孙建义,李卫芬,杜文理.短小芽孢杆菌β-1,3-1,4-葡聚糖酶基因克隆、表达及其酶特性研究[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2004,30(6):679-683. |
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作者姓名: | 吕文平 许梓荣 孙建义 李卫芬 杜文理 |
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作者单位: | 浙江大学,饲料科学研究所,教育部动物分子营养重点实验室,浙江,杭州,310029 |
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基金项目: | 高等院校骨干教师基金,国家自然科学基金 |
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摘 要: | 提取短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)基因组,通过PCR克隆了短小芽孢杆菌β-葡聚糖酶基因全长序列.结果表明:该基因全长754 bp,ORF为717 bp,编码239个氨基酸,计算分子量为26.98 kD,等电点为6.08.经Blast分析,该序列与地衣芽孢杆菌同源性最高(91%),该基因首次在GenBank上登录(登录号AY164456).在克隆载体上亚克隆基因全长,构建重组表达载体pET-pum,导入大肠杆菌BL 21中表达.SDS-PAGE电泳表明:在27 kD左右有表达带,酶活较低(7.24 U/mL),仅为出发菌酶活的16%,其最适温度为50 ℃左右,最适pH在5左右.
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关 键 词: | β-葡聚糖酶 短小芽孢杆菌 克隆 表达 |
文章编号: | 1008-9209(2004)06-0679-05 |
修稿时间: | 2003年9月22日 |
Cloning and Expression of β-1,3-1,4-glucanase Gene from Bacillus pumilus |
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Abstract: | |
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Keywords: | |
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