| 鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的Ⅰ型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析 |
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| 引用本文： | 王文成,张贵刚.鸡致病性大肠杆菌O1、O2和O78的Ⅰ型菌毛结构基因的克隆、序列测定及同源性分析[J].中国兽药杂志,2002,36(12):24-26. |
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| 作者姓名： | 王文成 张贵刚 |
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| 作者单位： | 辽宁省益康生物制品厂,辽宁,辽阳,111000 |
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| 摘 要： | 提取鸡致病性大肠杆菌分离株O1、O2和O78的基因组DNA作为模板,用TD-PCR技术从其中分别扩增出了0.55kb的Ⅰ型菌毛结构基因(piliA).将扩增得到的piliA基因片段,用TA克隆的方法分别克隆进pGEM-T载体中,转化至受体菌JM109中,用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选法,得到含阳性重组子的菌株,提取质粒用PstI单酶切及NcoI和PstI双酶切鉴定,结果证实,所构建的克隆质粒中均含有相应piliA基因.经DNA序列分析,其结构基因阅读框架大小为549 bp,但其中O1菌株Ⅰ型菌毛基因在第72位发生突变,有6个碱基插入.经DNA Star核酸分析软件分析,此3菌株的Ⅰ型菌毛基因的同源性为89.9%～92%.
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| 关 键 词： | 鸡致病性大肠杆菌、Ⅰ型菌毛、TA克隆、DNA测序、同源性 |
| 文章编号： | 1002-1280(2002)12-0024-04 |
| 修稿时间： | 2002年4月9日 |
Cloning and Sequence Analysis of Type 1 Pilin Structure Gene of Chicken Pathogenic Escherichia coli Serotype O1, O2 and O78 |
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