| 抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 |
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| 引用本文： | 杨国平,刁有祥,赵丹丹,等.抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白单克隆抗体的制备及鉴定[J].西北农林科技大学学报(社会科学版),2016,44(10):1-6. |
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| 作者姓名： | 杨国平 刁有祥 赵丹丹 等 |
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| 作者单位： | 山东农业大学 动物科技学院,山东农业大学 动物科技学院,山东农业大学 动物科技学院 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目（31272583）；山东自然科学基金项目（ZR2012CM002）；国家水禽产业技术体系项目（CARS-43-10） |
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| 摘 要： | 【目的】制备抗鸭坦布苏病毒(Duck Tembusu virus,DTMUV)NS5蛋白的单克隆抗体。【方法】将实验室保存的PET28a-NS5载体转化入Rosetta(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,利用纯化的鸭坦布苏病毒NS5蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,应用淋巴瘤细胞杂交技术结合有限稀释法制备单抗,并对单抗的特异性、反应性及其抗原表位和亚类进行鉴定。【结果】筛选获得2株稳定分泌针对DTMUV的NS5蛋白单抗的杂交瘤细胞,分别命名为A4D1和B4B8。此2株杂交瘤细胞诱导BALB/c小鼠的抗体效价均可达到1∶64 000。间接ELISA、Western blot和间接免疫荧光(IFA)检测结果表明,所获细胞分泌的抗体能与DTMUV及纯化的NS5蛋白发生特异性反应。经鉴定2株单抗的亚类均为IgG1型,通过叠加ELISA方法,初步判定2株单抗识别不同的抗原表位。【结论】成功获得了抗鸭坦布苏病毒NS5蛋白的单克隆抗体,为研究NS5蛋白的功能奠定了基础。
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| 关 键 词： | 鸭坦布苏病毒 NS5蛋白 单克隆抗体 |
| 收稿时间： | 2016/3/11 0:00:00 |
Preparation and identification of monoclonal antibody against NS5 protein of duck Tembusu virus |
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| YANG Guoping,DIAO Youxiang and ZHAO Dandan,et al.Preparation and identification of monoclonal antibody against NS5 protein of duck Tembusu virus[J].Journal of Northwest Sci-Tech Univ of Agr and,2016,44(10):1-6. |
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| Authors: | YANG Guoping DIAO Youxiang and ZHAO Dandan |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | duck Tembusu virus NS5 protein monoclonal antibody |
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