| 猪流行性腹泻病毒M和S蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 |
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| 引用本文： | 郑芳园,陈攀,范宝超,李玉峰.猪流行性腹泻病毒M和S蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备[J].畜牧与兽医,2014(5):35-40. |
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| 作者姓名： | 郑芳园 陈攀 范宝超 李玉峰 |
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| 作者单位： | 南京农业大学农业部细菌学重点开放实验室 |
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| 基金项目： | 公益性行业(农业)科研专项项目(200903036-10) |
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| 摘 要： | 采用PCR方法对猪流行性腹泻病毒(PEDV)M蛋白和S蛋白基因的亲水区进行扩增,扩增片段(命名为Ma和Sa)分别克隆至原核表达载体pET-32a(+)和pGEX-6p-1中,获得的重组质粒pET-32a-Ma和pGEX-6p-1-Sa转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE及Westernblot鉴定。表达产物经SDS-PAGE后切胶免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,间接ELISA方法检测小鼠免疫后血清效价,Westernblot和间接免疫荧光方法检测抗体的特异性。结果表明目标蛋白获得了正确表达,且制备的多克隆抗体具有较高的敏感性和特异性。PEDV Ma和Sa蛋白的表达及多克隆抗体的制备将为进一步构建PEDV的病毒样颗粒(VLP)抗原和建立血清学检测方法奠定基础。
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| 关 键 词： | 猪流行性腹泻病毒 M蛋白 S蛋白 原核表达 多克隆抗体 |
Prokaryotic expression of the M and S proteins of PEDV and preparation of their polyclonal antibodies |
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| ZHENG Fangyuan;CHEN Pan;FAN Baochao;LI Yufeng.Prokaryotic expression of the M and S proteins of PEDV and preparation of their polyclonal antibodies[J].Animal Husbandry & Veterinary Medicine,2014(5):35-40. |
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| Authors: | ZHENG Fangyuan;CHEN Pan;FAN Baochao;LI Yufeng |
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| Institution: | ZHENG Fangyuan;CHEN Pan;FAN Baochao;LI Yufeng;Key Laboratory of Bacteriology of the Ministry of Agriculture,Nanjing Agricultural University; |
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