| H5亚型禽流感病毒一步法复合RT-PCR检测方法的建立 |
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| 引用本文： | 包红梅,王秀荣,李一经,陈化兰.H5亚型禽流感病毒一步法复合RT-PCR检测方法的建立[J].中国兽医学报,2008,28(7). |
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| 作者姓名： | 包红梅 王秀荣 李一经 陈化兰 |
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| 作者单位： | 1. 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,国家动物流感重点开放实验室,黑龙江,哈尔滨,150001
2. 东北农业大学,动物医学院,黑龙江,哈尔滨,150030 |
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| 摘 要： | 针对近年来H5亚型禽流感(AI)频发的严峻形势,本研究通过分析GenBank中AI的221个HA基因和M基因序列,在保守区内用Oligo4.0软件设计合成2对引物,建立了能同时鉴别AIV型与亚型的一步法复合RT-PCR,其扩增的目的片段大小分别为372、229 bp。通过对AIV尿囊液和棉拭子浸出液进行不同稀释倍数检测,结果病毒在尿囊液最低检出量为10-4稀释。用病毒分离和该方法同时检测不同脏器、口咽及泄殖腔棉拭子样品,结果该方法检测灵敏度比病毒分离低10~100倍。用该方法检测H1~H15亚型AIV和鸡新城疫病毒等其他14种禽病毒,结果所有AIV均有M基因229 bp的目的条带,且仅H5亚型AIV有372 bp的特异性条带,而其他14种禽病毒无任何目的条带。
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| 关 键 词： | 禽流感病毒 一步法复合RT-PCR H5N1 亚型鉴别 快速诊断 亚型 禽流感 病毒 一步法 检测方法 avian influenza virus subtype detection technique duplex step 种禽 特异性条带 鸡新城疫 灵敏度比 样品 泄殖腔 口咽 脏器 同时检测 |
Development of one step duplex RT-PCR technique for detection of H5 subtype avian influenza virus |
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| BAO Hong-mei,WANG Xiu-rong,LI Yi-jing,CHEN Hua-lan.Development of one step duplex RT-PCR technique for detection of H5 subtype avian influenza virus[J].Chinese Journal of Veterinary Science,2008,28(7). |
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| Authors: | BAO Hong-mei WANG Xiu-rong LI Yi-jing CHEN Hua-lan |
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