| BtCry1Ac、BADH双价基因对烟草的遗传转化及表达检测 |
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| 引用本文： | 刘娇娇,王桂英,任亚超,董研,徐丽娜,梁海永.BtCry1Ac、BADH双价基因对烟草的遗传转化及表达检测[J].河北林果研究,2014(2). |
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| 作者姓名： | 刘娇娇 王桂英 任亚超 董研 徐丽娜 梁海永 |
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| 作者单位： | 河北农业大学林学院;廊坊市农林科学院; |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划“863”计划“杨树分子育种与品种创制”(2011AA100201) |
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| 摘 要： | 利用农杆菌介导法,将植物转化载体p209-BtCry1Ac-BADH转化烟草,获得了Kan筛选的完整再生植株。经PCR检测证明,4个株系中检测到BtCry1Ac和BADH基因。荧光定量PCR检测表明,检测到目的基因的株系中有3个株系的2个目的基因均在转录水平得到表达,且存在表达差异;有1个株系未检测到BADH基因的表达。ELISA毒蛋白检测表明,经荧光定量PCR筛选的3个株系均检测到毒蛋白的表达,含量最高为414.63ng/g。室内饲虫试验表明,3个转基因株系中只有2个株系对斜纹夜蛾幼虫表现出抗虫性,校正死亡率最高为38.2%,其余均未表现出明显抗虫性。选取2个株系进行组培苗耐盐试验,表明在不同NaCl浓度下,转基因株系与对照之间没有明显差异。研究中,有些系号经PCR检测说明BtCry1Ac和BADH基因已整合到植物基因组中,但荧光定量PCR和ELISA检测表明虽然基因整合到植物基因组中却未表达,有可能发生了基因沉默。
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| 关 键 词： | BtCryAc BADH 烟草 遗传转化 表达检测 |
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